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浮游菌检验标准操作规程

2014-04-03 17:13阅读:
目的:建立洁净区(室)浮游菌的监测规程,保证药品在规定的洁净级别内生产、检验
范围:适用于洁净区(室)浮游菌的监测
责任:化验员、中心化验室主任负责贯彻实施,现场质检员负责监督执行。
内容:
1 定义
1.1 浮游菌
用标准方法收集悬浮在空气中的活微生物粒子,通过专门的培养基,在适宜的生长条件下繁殖到可见的菌落数。
2 仪器与设备
浮游菌采样器恒温培养箱高压蒸汽灭菌器
3 培养皿
一般采用Φ90mm×15mm玻璃培养皿。
4 培养基

营养琼脂培养基
5 操作步骤
5.1 浮游菌监测点选择
5.1.1 浮游菌最少采样点数
浮游菌采样点数主要根据洁净区的洁净级别和房间面积设置,其最少采样点数见表1。
表1: 洁净区(室)的最少采样点数
面积(㎡)
洁净度级别
A级
B级
C级
D级
<10
2-3
2-3
2
2
≥10-<20
4
4
2
2
≥20-<40
8
8
2
2
≥40-<100
16
16
4
2
注:表中的面积对于单向流洁净室,指的是送风面积;对于非单向流洁净室,指的是房间面积。
5.1.2 浮游菌监测点位置
5.1.2.1取样点一般布置在离地0.8m-1.5m之间或操作台的高度;
5.1.2.2尽量避免在回风口附近取样(距离1m以上),且测试人员应站在取样口的下风侧,并尽量少走动;
5.1.2.3送风口测点位置离开送风面30cm左右;
5.1.2.4日常监测时,那些与产品相临近的区域,以及可能与产品直接接触的空气和设备附近均应考虑增加取样点和取样次数;人员活动频繁或人员较集中的区域也需加强监控;
5.1.2.5除受洁净区的设备限制外,取样点应在整个洁净区均匀布置;
5.1.2.6动态测试取样时应避免设备对气流产生干扰;
5.1.3 采样次数和最小采样量
每个监测点取样1次,不同洁净级别的采样点每次最小采样量见表2。
表2: 洁净区(室)采样点的最小采样量

采样量(L/次)
静态
动态
A
1000
1000
B
1000
1000
C
500
500
D
100
不作规定
5.2 测试前仪器培养皿表面必须严格消毒。
5.2.1 采样器进入被测房间前先用消毒房间的消毒剂灭菌,用于A级洁净室的采样器应一直放在被测房间内。
5.2.2 用消毒剂擦净培养皿的外表面
5.2.3 采样前,先用消毒剂消毒采样器的顶盖,转盘以及罩子内外面。采样结束,再用消毒剂轻轻喷射罩子的内壁和轻盘。
5.2.4 采样口及采样管使用前必须高温灭菌,如用消毒剂对采样管的外壁及内壁进行消毒时,应将管中的残留液倒掉晾干。
5.2.5 采样者应穿戴与被测洁净区域相应的工作服,在转盘上放入或调换培养基前,双手用消毒剂消毒。
5.2.6 仪器经消毒后不放入培养皿,开动浮游菌采样器,使仪器中的残余消毒剂蒸发,时间不少于5min,并调好流量,转盘转速。
5.2.7 关闭真空泵,放入培养皿。盖上盖子后调节采样器缝隙高度
5.2.8置采样口于采样点后,依次开启采样器,真空泵,转动定时器,根据采样量设定采样时间。
5.3 培养
5.3.1 全部采样结束后,将培养皿倒置于恒温培养箱中培养。
5.3.2 在30℃-35℃培养箱中培养,时间不少于48h.
5.3.3 每批培养基应有空白对照试验,检验培养基本身是否污染。每批选定2只空白培养皿。
5.4 菌落计数5.4.1 用肉眼直接计数,标记,然后用5-10倍 放大镜检查,有否遗漏。
5.4.2 若平板上有2个或两个以上的菌落重叠,可分辨时仍以2个或2个以上菌落计数。
5.5布皿条件
5.5.1 温度和湿度
洁净区的温度和相对湿度应与其生产工艺要求相适应(温度控制在18℃~26℃,相对湿度控制在45%~65%)。
5.5.2 静压差
洁净区与非洁净区之间的静压差应≥10Pa;不同洁净级别洁净区之间的静压差应≥10Pa;同一洁净级别的洁净区(室)应根据使用要求呈正压或负压(≥5Pa)。
5.6 结果计算
5.6.1 用计数方法得出各个培养皿的菌落数。
5.6.2 每个测定点浮游菌平均浓度的计算。
菌落数
浮游菌检验标准操作规程浮游菌平均浓度=
采样量
5.7 结果评定
用浮游菌平均浓度判断洁净室(区)空气中的微生物。
5.7.1 每个测点的浮游菌平均浓度必须低于所选定的评定标准中关于细菌浓度的界限。 5.7.2 若某测定点浮游菌平均浓度超过评定标准,则必须对此区域先行消毒,然后重新采样两次,两次测试结果必须合格。

5.8 附图:洁净区采用点布置图
浮游菌检验标准操作规程 浮游菌检验标准操作规程
浮游菌检验标准操作规程
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