新浪博客

稳定同位素标记技术(SILAC)-定量蛋白质组学

2015-12-24 10:53阅读:
稳定同位素标记技术(Stable Isotope Labeling By Amino Acids In Cell Culture,SILAC)SILAC是体内标记,试验周期相对来说较长一点,SILAC定量主要是一级质谱定量
其实验原理是在细胞培养基中加入轻、中或重型稳定同位素标记的必需氨基酸(赖氨酸和精氨酸),通过细胞的正常代谢,使新合成的蛋白带上稳定同位素标签。等量混合各类型蛋白质,酶解后进行质谱分析。通过比较一级质谱图中同位素峰型的面积大小进行相对定量,同时二级谱图对肽段进行序列测定从而进行蛋白鉴定。
特点 :
活细胞水平标记技术,标记效果稳定,其标记效率不受裂解液的影响,标记效率可高达100%。
标记采用的是体内标记技术,更接近样品真实状态。

稳定同位素标记技术(SILAC)-定量蛋白质组学




我的更多文章

下载客户端阅读体验更佳

APP专享