过氧化氢（Hydrogenperoxide,H2O2）特异性荧光探针专题

2019-01-25 15:39阅读：

http://blog.sina.cn/dpool/blog/u/5948434894

Detection and measurement of hydrogen peroxide:
过氧化氢（Hydrogen peroxide, H₂O₂）特异性荧光探针专题

专题关键词：
ROSGreen^TM H₂O₂ Probe；BES-H2O2-Ac；hydrogen peroxide (H₂O₂) 过氧化氢探针；HYDROP-EX；Amplex Red reagent；Peroxidase 过氧化物酶；

专题背景：
活性氧（ROS）比如超氧阴离子（O2 ^-.），过氧化氢（H₂O₂）和羟基自由基（HO .）是各种疾病病理发展中的重要调节剂。DCFH

SPAN>DCFH-DA普遍用作荧光探针测定细胞来源的过氧化氢（H₂O₂），但这些化合物最大的缺陷在于对H₂O₂的选择性极其弱。
为此，很多公司开发特异性的过氧化氢（H₂O₂）探针，以阐明H₂O₂导致疾病相关的细胞反应和动力学功能。

一、高选择性过氧化氢探针（BES-H2O2-Ac， BES-H2O2，from wako chemical）
Wako chemical公司开发两款BES-H₂O₂，分别检测细胞来源的H₂O₂和细胞非渗透性的H₂O₂，具高选择性。
1）两款探针作用机理如下：

2）两款探针的应用示例【详见maokangbio】：
3）两款探针的订购信息：欢迎来电咨询021-54736159，或QQ:2971634497，1563822900。

货号	名称	规格
028-17811	BES H2O2-Ac (cell-permeant)，Ex/Em=485/515nm	1mg
024-18751	BES-H2O2 (Cell-impermeant) ，Ex/Em=485/515nm	1mg

产品优势：
高度选择性结合H2O2;
BES H2O2-Ac具细胞膜渗透性；
检测细胞来源的H2O2；
适用于荧光成像；

二、高选择性过氧化氢探针（ROSGreen^TM H2O2 Probe 过氧化氢荧光探针，from MKBio）
懋康生物（MKBio）开发一款细胞膜渗透性的过氧化氢特异性探针：ROSGreen^TM H2O2 Probe。
1） 探针描述
本ROSGreen^TM H₂O₂ Probe正是克服以上缺陷开发的一款过氧化氢（H₂O₂）选择性探针。探针本身无荧光，可见光区域内无吸收峰。一旦接触H₂O₂，瞬间激发荧光增加并伴随可见波长吸收带的生成（Ex/Em= 490/514nm）。因其二元的吸收/发射荧光反应，此探针具有较大的动力学范围。与相似的ROS比如O₂^–，NO，或OCl^-相比，ROSGreen^TM H₂O₂ Probe对H₂O₂呈现出＞100倍（100-fold）的选择性。
2） 应用示例（详见maokangbio网）
3） 订购信息：欢迎来电咨询021-54736159，或QQ:2971634497，1563822900。

货号	名称	规格	价格（元）
MX5202-1MG	ROSGreen^TM H₂O₂ Probe 过氧化氢荧光探针	1mg	1480

产品优势：
高度选择性结合H2O2;
ROSGreen^TM H2O2 Probe具细胞膜渗透性；
检测溶液或细胞来源的H2O2；
适用于荧光成像和流式细胞分析；

三、选择性过氧化氢探针（ADHP，Amplex^® Red过氧化氢探针，from MKBio）
懋康生物（MKBio）供应的10-Acetyl-3,7-dihydroxyphenoxazine (ADHP)，中文名10-乙酰基-3,7-二羟基吩嗪，以商标名Amplex^® Red在市场上销售，是目前为止最灵敏和稳定的荧光探针用来检测HRP和H₂O₂。
1） 基本描述
10-Acetyl-3,7-dihydroxyphenoxazine (ADHP)，中文名10-乙酰基-3,7-二羟基吩嗪，以商标名Amplex^® Red在市场上销售。ADHP是一种高度灵敏和稳定的过氧化物酶底物，选择性检测过氧化氢（H₂O₂）。存在辣根过氧化物酶（HRP）的体系中，这一基本无色和非荧光的ADHP与H₂O₂以1：1的化学定量比反应，生成强红色荧光的试卤灵（Resorufin），可通过荧光光度计和酶标仪分析结果。许多酶反应能产生H₂O₂，因此，ADHP能够用在偶联酶促反应中检测许多不同酶的生物活性。
2） 工作原理

图. 使用ADHP进行偶联酶促反应的工作原理。葡萄糖氧化酶催化葡萄糖氧化生成过氧化氢（H₂O₂），通过辣根过氧化物酶（HRP）催化ADHP反应生成强荧光试卤灵（Resorufin）。
3） 常见应用（详见maokangbio网站）
10-Acetyl-3,7-dihydroxyphenoxazine (ADHP)是目前为止最灵敏和稳定的荧光探针用来检测HRP和H₂O₂。
A） ADHP普遍用来检测许多免疫实验中的HRP；
B） ADHP用来检测微量的H₂O₂；
4） 订购信息：欢迎来电咨询021-54736159，或QQ:2971634497，1563822900。

货号	产品名称	规格	价格（元）
MX5203-1MG	10-Acetyl-3,7-dihydroxyphenoxazine (ADHP) 过氧化氢探针	1mg	339
MX5203-5MG	10-Acetyl-3,7-dihydroxyphenoxazine (ADHP) 过氧化氢探针	5mg	1429
MX5203-25MG	10-Acetyl-3,7-dihydroxyphenoxazine (ADHP) 过氧化氢探针	25mg	4489

四、过氧化氢清除剂（Hydrogen Peroxide Scavenger from MKBio）

货号	产品名称	规格	价格（元）
MP0921-1G	Catalase from bovine liver, 2000-5000 units/mg protein 过氧化氢酶	1g	240
MP0921-5G	Catalase from bovine liver, 2000-5000 units/mg protein 过氧化氢酶	5g	800
MX4809-5MG	EUK-134 SOD/过氧化氢酶模拟物	5mg	528
MX4809-50MG	EUK-134 SOD/过氧化氢酶模拟物	50mg	1798
MX4814-25G	N,N'-Dimethylthiourea (DMTU) N,N'-二甲基硫脲	25g	368
MX4814-100G	N,N'-Dimethylthiourea (DMTU) N,N'-二甲基硫脲	100g	948

五、过氧化氢活性检测试剂盒（Hydrogen Peroxide assay kit）（详见maokangbio网）
懋康生物作为AAT bioquest在中国的授权代理商，提供该品牌的优质过氧化氢活性检测试剂盒，比色法（Cat#: 11500）和荧光法（Cat#:11501），请根据实验具体需求以及现有检测仪器来选择合适产品。

货号	产品名称	规格	价格（元）
11500	Amplite™ 比色法氢过氧化物检测试剂盒 Colorimetric Hydrogen Peroxide Assay Kit	500 Tests	2940
11501	Amplite™ 荧光法氢过氧化物检测试剂盒红色荧光 Fluorimetric Hydrogen Peroxide Assay Kit	500 Tests	2940

1）试剂盒特征（比色法，Colorimetric Hydrogen Peroxide Assay Kit）
测定对象：溶液和细胞裂解液
检测原理：使用Amplite™ IR过氧化物酶底物来定量检测溶液和细胞提取物内的过氧化氢水平。一旦过氧化氢氧化，无色的Amplite™ IR产生强蓝色产物，在pH 4-10范围内不受pH影响。
测定仪器：吸光度测定酶标仪（650nm）
结果展示：

2）试剂盒特征（荧光法，Fluorimetric Hydrogen Peroxide Assay Kit）
测定对象：溶液和细胞裂解液
检测原理：使用Amplite™ red过氧化物酶底物来定量检测溶液和细胞提取物内的过氧化氢水平。
测定仪器：荧光酶标仪（540nm/590nm）
结果示例：

— —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】

上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科学和生物技术领域研究的试剂、仪器和实验室消耗品与实验服务工作，主要从事细胞生物学、植物学、分子生物学、免疫学、生物化学、蛋白组学。生物制药与诊断试剂研发生产等领域。本公司秉承“以人为本，以诚为信、合同守信”的经营理念。坚持'品质保障'的原则为广大客户提供优质产品。

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