混合酸酐法是多肽合成缩合方法中最难最有效的方法之一，无机酸、有机酸都可用于形成混合酸酐，通常情况下，获得广泛使用的寥寥无几，譬如氯甲酸烷基酯，如今主要换成了氯甲酸异丁酯。
氯甲酸酯和羧基组分通过反应形成酸酐，两者的羰基相互竞争，氨解反应因为其亲电性和（或）空间位阻有了可供选择的区域。亲核试剂胺对氨基酸组分的羧基进行进攻可以在由氯甲酸烷基酯以及N保护的氨基酸羧酸盐形成混合酸酐时，使预期的肽衍生物形成，同时释放出游离酸形式的活性成分。在应用氯甲酸烷基酯时，不稳定的游离的单烷基碳酸，会立即分解形成相应的醇和二氧化碳。
氯甲酸酯和羧基组分通过反应形成酸酐，两者的羰基相互竞争，氨解反应因为其亲电性和（或）空间位阻有了可供选择的区域。亲核试剂胺对氨基酸组分的羧基进行进攻可以在由氯甲酸烷基酯以及N保护的氨基酸羧酸盐形成混合酸酐时，使预期的肽衍生物形成，同时释放出游离酸形式的活性成分。在应用氯甲酸烷基酯时，不稳定的游离的单烷基碳酸，会立即分解形成相应的醇和二氧化碳。