1. 亲和素(avidin, AV)还是链霉亲和素(streptavidin,
SA)?
虽然亲和素(avidin,AV)与链霉亲和素(streptavidin,SA)对生物素(Biotin)在某些应用中,亲和素的结合具有很高的亲和力(avidin,AV)主要问题是它的非特异性组合,这是由于亲和素造成的(avidin,AV)糖链和高等电点的结构(pI)。因此,使用链霉亲和素(streptavidin,SA)它可以显著防止这种非特异性,或者使用相同的生物素来保留它(Biotin)结合脱糖化亲和素的性质(avidin,AV)这种非特异性也可以预防。
2.使用链霉亲和素(streptavidin,SA)-生物素(Biotin)作为多功能检测系统.
链霉亲和素系统生物素(Biotin-Streptavidin-System)在将抗体共轭连接到生物素的帮助下(Biotin)使用亲和素(avidin,AV)或链霉亲和素(streptavidin,SA)其检测方法几乎可以应用于任何免疫测定。它可以与各种廉价、高质量的商业荧光染料或酶相连。这使得生物素化抗体具有信号放大和灵敏度增加的优点,但同时也需要优化抗体和共轭连接溶剂。
3.使用生物素化抗体时,选择合适的缓冲系统.
强烈建议在封闭缓冲液等溶液中避免使用胎牛血清,以防止高背景和低信噪比(fetalbovineserum,FBS)和生物素(Biotin)。一个好的替代品是0.1%–2.0%牛血清
虽然亲和素(avidin,AV)与链霉亲和素(streptavidin,SA)对生物素(Biotin)在某些应用中,亲和素的结合具有很高的亲和力(avidin,AV)主要问题是它的非特异性组合,这是由于亲和素造成的(avidin,AV)糖链和高等电点的结构(pI)。因此,使用链霉亲和素(streptavidin,SA)它可以显著防止这种非特异性,或者使用相同的生物素来保留它(Biotin)结合脱糖化亲和素的性质(avidin,AV)这种非特异性也可以预防。
2.使用链霉亲和素(streptavidin,SA)-生物素(Biotin)作为多功能检测系统.
链霉亲和素系统生物素(Biotin-Streptavidin-System)在将抗体共轭连接到生物素的帮助下(Biotin)使用亲和素(avidin,AV)或链霉亲和素(streptavidin,SA)其检测方法几乎可以应用于任何免疫测定。它可以与各种廉价、高质量的商业荧光染料或酶相连。这使得生物素化抗体具有信号放大和灵敏度增加的优点,但同时也需要优化抗体和共轭连接溶剂。
3.使用生物素化抗体时,选择合适的缓冲系统.
强烈建议在封闭缓冲液等溶液中避免使用胎牛血清,以防止高背景和低信噪比(fetalbovineserum,FBS)和生物素(Biotin)。一个好的替代品是0.1%–2.0%牛血清
