银耳多糖提取方法详解
2016-10-28 15:04阅读：
银耳多糖提取方法详解
银耳多糖是一种菌类多糖，有别于植物多糖和动物多糖，银耳多糖因侧链分枝不同具有几种类型，通常我们使用较多的是酸性杂多糖和中性杂多糖。水解后其组成中有木糖、甘露糖、岩藻糖、葡萄糖和葡萄糖醛酸等，含糖量在75%以上，其制品中除多糖外尚含有孢子。为白色粉末，溶于水，不溶于醇、醚等有机溶剂。
银耳多糖是一种多聚糖，具有免疫调节、抗辐射、抗感染、清除体内自由基、延缓衰老、吸收尿酸等代谢产物。应用在皮肤上时，会形成一层具有柔韧性的保护层，具有保湿，抗衰老，抗氧化作用，在形成保护膜之后，能够减少辐射对肌肤的损害，更好的保护皮肤。
银耳多糖是从银耳中提取出来的，而银耳多糖是附在银耳细胞内部的细胞壁上，需要将细胞壁打破，将多糖从细胞壁上析出并且提取出来，通过多次提纯得到银耳多糖的粉末。也许听起来很容易但是做起来就不是那么简单，首先要对杂质的处理，其次是提纯的工艺精度，第三，要提高原料的利用率。这需要经验的积累和多种原料的挑选，每家企业都有自己的方法。
而在这里，会介绍几种方法简介。
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通常的提取步骤如下图所示：
通常有热水浸提法，加压水提法，亚临界水提法，酸提法，碱提法，酶提法，超声波辅助提取，比较罕见实验室常使用的是超临界提取法，微波辅助提取，膜分离提取法，真空气流破壁提取法，化学渗透发。
1.热水浸提法
大多数真菌多糖可溶于水，在热水中成黏液状，在乙醇等有机溶液中形成沉淀，因此热水提取法是目前最常用的提取真菌多糖党的方法。主要借助热力作用是食用菌细胞发生质壁分离，水作为溶剂渗入细胞壁和细胞质中，溶解液泡中的物质使其穿过细胞壁，扩散到外部溶液中，在进行提取步骤。
检测实验结果：通过对提取工艺中热水提取中的温度，时间，及料水，以这三个因素进行政教实验。结果表明浸提温度对多糖影响率较大。
热水浸提法的优点为实验设备简单，操作方便，提取成本低，是用于大规模的工业生产，但是此法存在不足的是需要经过多次浸提且费时费料，劳动强度大，过长的浸提时间会破坏多糖的结构，进而导致生物活性降低。
2.酶提法
酶提法是通过酶反应将原料组织分解，一出去细胞壁和膜上的果胶，纤维素以及蛋白质从而降低提取难度，有利于细胞壁内多糖的溶出，使多糖的提取率提高。酶提法的一般方法为按照一定料液比加入样品干粉和生物酶，蒸馏水，在合适的温度和pH至下酶解一定时间，然后升温。酶在一定的温度下提取一段时间，离心取上清液即可测定多糖的含量。由于真菌内壁成分复杂，而单一酶提法不能完全提取出全部的银耳多糖，所以利用多种酶复合产生协同作用，充分破坏菌体细胞结构，最大限度的提高多糖的提取率。
酶提法的限制：酶提法使银耳多糖获得率大幅度的增加还具有提取条件温和，提取时间短，对多糖损伤小，杂质易除的优点，但是酶的价格较高，又容易失活，在实验中温度控制要求十分严格（酶对于温度的变化十分敏感），且多糖的高级结构，可能因为酶的作用而改变。
3.超声波辅助提取法
超声波辅助提取多糖，利用超声波激荡空气产生震动的原理，对银耳有极大的压力，造成真菌细胞壁以及整个生物体破裂，同时超声波产生的刺激效应如机械振动，乳化扩散，击碎，化学效应等也能加速真菌细胞内多糖的释放，扩散及溶解，因而能很好的提高多糖的提取率，超声波辅助提取法，具有提取效率高，提取时间短，提取温度低，多糖结构稳定等优点，但是超声波提取时间不宜过长，否则会造成糖苷键的断裂而导致提取率的降低。
4.酸，碱提法
酸碱法提取银耳多糖，通过酸碱液的充分作用，使得银耳的细胞，细胞壁充分吸收水分膨胀而破裂从而使银耳多糖充分游离出来，提高多糖的获得率。
用酸提取多糖的方法，常用草酸提取，也可以用盐酸提取，草酸的浓度一般在1%~3%之间，提取时间和水，碱相差不大，一般在2h~3h之间，提取后浓缩提取液。由于草酸在低温下结晶，可将浓缩液放置冰箱中冷却，除去草酸，其他过程同水提法。但是酸旺旺会破坏糖苷键，影响多糖的浸取率，一般不用酸来提取多糖。
用碱液提取多糖也是常用方法，用碱提取多糖时，提取液粘稠度高，乙醇沉淀后得到的粗多糖多，但是纯度低，蛋白质含量高，提纯后得到的多糖量少。在药用真菌多糖中，除了水溶性多糖外，还有碱溶性多糖。这类多糖提取一般先用水提法提取水溶性多糖，然后用碱液对残渣进行提取，以后的碱溶性多糖，然后按照水提取法进行。
酸，碱提法的限制：由于使用酸作为提取的介质，会破坏糖苷键，间接地造成多糖的得率，还可能会对容器造成腐蚀，除弱酸外不宜采用；而使用碱提法生成的溶液浓度过大，会造成过滤的困难，影响产量。
