液相色谱柱柱流失的判断方法

一、液相色谱柱柱流失影响因素
首先明白液相色谱柱柱流失是不可避免的。柱流失程度与什么因素有关？
1、柱流失程度与固定相种类和色谱柱规格有关，一般固定相的量越多，柱流失则相对较高。
2、柱流失与柱温以及载气中氧气的浓度有关。高温下，固定相的分解会加快，因此，高温时的流失会比低温时高。氧气是许多固定相分解的催化剂，特别是在高温时段，强调载气的纯度和液相色谱柱安装的气密性，一方面就是出于氧气会加剧柱流失的考虑。
3、此外，液相色谱柱随着使用次数和时间的增加，固定相的稳定性最终也会发生不可逆的变化，导致柱流失的增加。液相色谱柱柱流失严重情况多出现在进样的溶液类型，5MS的柱子是非极性的，当使用极性溶剂时，就会发生反应而导致大量柱流失，在做测试时一定要留意样品的性质。
二、液相色谱柱柱流失的判断方法
怎么从色谱图上看出柱流失？
诊断液相色谱柱是否存在流失问题的最佳方法是安装液相色谱柱后，在设定的条件下，做一次空白色谱图，并保存。必要时，将最近的运行和空白运行色谱图对比；如果空白运行中产生了很多峰，则液相色谱柱性能改变了，如果有GC-MS，则可以通过离子峰的质荷比来判断相应离子是否来自于柱流失。
表1 GC/MS常用毛细管柱的柱流失碎片离子


柱流失会随着温度的升高加剧。我们可以通过流失曲线或图清楚地看到这种变化。一般我们会在程序升温的条件下做一次空白试验，温度要升至液相色谱柱的温度上限，并持续该温度10～15分钟