什么是同位素标记化合物
同位素标记化合物是指化合物中某一个或多个原子或其化学基团被其易辨认的同位素或其它易辨认的核素或基团所取代而得到的产物。这种取代过程称为标记。放射性标记化合物:
若取代的核素是放射性核素,则所得产物就称为放射性标记化合物。此标记过程称为放射性标记。
自1912年G. Hevesy和F. Paneth将放射性核素作为示踪剂以来,示踪实验已成为目前科学研究的重要手段之一。该技术在生物学、医学和农业科学等领域中,已得到了广泛的应用,对带有示踪原子的标记化合物的需求量增大,标记化合物的制备就成为示踪实验能否进行的前题。四十年代后期,人工放射性核素大规模生产; 快速制备方法与快速分离技术的发展,为半衰期短的如11C、13N、150等作 为标记物的使作提供了可能。
常用同位素标记化合物
14 C常用的同位素标记化合物为多种氨基酸,如亮氨酸、赖氨酸、脯氨酸等。其中最常用的是亮氨酸,因这种氨基酸在各种蛋白质中都广泛存在。 14 C标记的位置有多种,但在应用于mRNA的 生物 活性测定时都可采用。至于选择何种氨基酸,需视拟合成的蛋白质性质、成分而定。
3H常用的标记物有氨基酸或核苷酸。氨基酸的用途同 14 C的氨基酸。核苷酸中最常用的核苷如尿嘧啶核苷及胸腺嘧啶核苷,用于细菌及哺乳动物细胞培养时的核酸标记。核苷三磷酸中以a型的NTP及dNTP为最常用。此处N代表A、G、C、U或T四种碱基。用于核酸的标记,如缺口翻译标记。也可用于染色体原位杂交或电镜核酸分析等。
35 S标记的氨基酸最常用的是蛋氨酸,用途同 14 C标记。[α- 35 S]dNTP中的α位磷酸基中的氧用硫取代,得到的核苷三磷酸,可用于核苷酸序列分析,也可用于缺口翻译法标记DNA。
32 P常用标记物为各种核苷三磷酸。 32 P的标记分两大类。一类标在γ位置,做磷酸转移法标记核酸用,另一类标在α位置,做核苷酸转移标记核酸用。如标记核酸的末端常用[γ
同位素标记化合物是指化合物中某一个或多个原子或其化学基团被其易辨认的同位素或其它易辨认的核素或基团所取代而得到的产物。这种取代过程称为标记。放射性标记化合物:
若取代的核素是放射性核素,则所得产物就称为放射性标记化合物。此标记过程称为放射性标记。
自1912年G. Hevesy和F. Paneth将放射性核素作为示踪剂以来,示踪实验已成为目前科学研究的重要手段之一。该技术在生物学、医学和农业科学等领域中,已得到了广泛的应用,对带有示踪原子的标记化合物的需求量增大,标记化合物的制备就成为示踪实验能否进行的前题。四十年代后期,人工放射性核素大规模生产; 快速制备方法与快速分离技术的发展,为半衰期短的如11C、13N、150等作 为标记物的使作提供了可能。
常用同位素标记化合物
14 C常用的同位素标记化合物为多种氨基酸,如亮氨酸、赖氨酸、脯氨酸等。其中最常用的是亮氨酸,因这种氨基酸在各种蛋白质中都广泛存在。 14 C标记的位置有多种,但在应用于mRNA的 生物 活性测定时都可采用。至于选择何种氨基酸,需视拟合成的蛋白质性质、成分而定。
3H常用的标记物有氨基酸或核苷酸。氨基酸的用途同 14 C的氨基酸。核苷酸中最常用的核苷如尿嘧啶核苷及胸腺嘧啶核苷,用于细菌及哺乳动物细胞培养时的核酸标记。核苷三磷酸中以a型的NTP及dNTP为最常用。此处N代表A、G、C、U或T四种碱基。用于核酸的标记,如缺口翻译标记。也可用于染色体原位杂交或电镜核酸分析等。
35 S标记的氨基酸最常用的是蛋氨酸,用途同 14 C标记。[α- 35 S]dNTP中的α位磷酸基中的氧用硫取代,得到的核苷三磷酸,可用于核苷酸序列分析,也可用于缺口翻译法标记DNA。
32 P常用标记物为各种核苷三磷酸。 32 P的标记分两大类。一类标在γ位置,做磷酸转移法标记核酸用,另一类标在α位置,做核苷酸转移标记核酸用。如标记核酸的末端常用[γ
