荧光原位杂交技术发展及应用

从20世纪90年代至今，荧光原位杂交技术在方法上逐步从单色向多色、从中期染色体FISH向粗线期染色体FISH到纤维（fiber）-FISH发展，其灵敏度和分辨率也有了大幅度进步。
1. 多色荧光原位杂交
首要，Cremer等用生物素和汞或氨基乙酰荧光素（AFA）标记探针建立了双色荧光原位杂交（FISH）技能。然后1990年Nederlof等提出用3种荧光素勘探3种以上的靶位DNA序列，创建了多色荧光原位杂交方法。在此基础上又建立了以下5种方法：
染色体描绘；
回转染色体描绘；
多五颜六色原位启动标记；
比较基因组杂交；
光谱染色体自动核型剖析；
交叉核素色带剖析。
可将屡次繁琐的FISH试验和多种不同基因的定位在一次FISH试验中完成。
2.DNA纤维荧光原位杂交
Weigant等和Heng等首要使用化学方法将染色体进行线性化，再以此线性化的染色体DNA作为载体进行FISH，使FISH的分辨率显著进步。Parra和Windle（1993），Heiskanen等（1994），Florijn等（1995），进一步改进了扩展DNA纤维的方法，使DNA纤维的扩展程度从最初的80 kb/um达到了现在的2.5~3.5 kb/um。
荧光原位杂交技术应用
1.技术特点：
（1）操作简便，立体分辨率高，调查剖析便利，信号亮堂明晰以及安全风险小；
（2）检测速度及探针安稳性比放射性标记探针好，探针标记后安稳，一次标记后可运用二年；
（3）方法灵敏，能迅速得到结果；
（4）在同一标本上，使用不同颜色的荧光集团标记探针可一起检测几种不同的探针；
（5）不仅可用于分裂期细胞染色体数量或结构变化的研讨，而且还可用于间期细胞的染色体数量及基因改动的研讨；
（6）标记探针和荧光素试剂均可置办，使得FISH