SDS-PAGE实验FAQ
1、SDS-PAGE蛋白电泳配胶不凝固怎么办？
（1）可多加过硫酸铵试试
（2）可多加点TEMED来加速凝固
（3）配好胶后放在温箱里凝的快些，环境温度低会影响凝的速度。在冬天灌好胶后放在培养箱里，一般情况下很快就凝了，可以提高效率。
（4）经常出现浓缩胶凝但不成形，非常粘，这是因为C液（浓缩胶缓冲液）的pH值不对，重新配制C液
2、如何提高SDS-PAGE电泳的分辨率?？
充分聚合聚丙烯酰胺。
建议：有些同学会即配即用或在4度冰箱放置，一方面易导致凝固不充分，另一方面可导致SDS结晶。待凝胶在室温凝固后，可在室温下放置一段时间使用，一般凝胶可在室温下保存4天，SDS可水解聚丙烯酰胺。
3、胶聚合速度过慢的原因
重新配了tris缓冲液和acrylamide溶液。最好是定期就重新配制tris缓冲液。
4、样品该怎么处理?
针对样品分离目的的不同，主要有三种处理方法：带有烷基化作用的还原SDS处理、还原SDS处理以及非还原SDS处理。
1、带有烷基化作用的还原SDS处理：碘乙酸胺的烷基化作用很好的并且长期的保护SH基团，得到较窄的谱带;另碘乙酸胺可捕集过量的DTT，以防止银染时的纹理现象。
2、还原SDS处理：在上样buffer中加入SDS和DTT(或Beta巯基乙醇)后，蛋白质构象被解离，电荷被中和，形成SDS与蛋白相结合的分子，在电泳中，只根据分子量来分离。这是电泳最常见的处理方式，样品稀释适当浓度，加入上样Buffer，离心，沸水煮5min，再离心加样。
3、非还原SDS处理：生理体液、血清、尿素等样品，一般来说只用1%SDS，沸水中煮3分钟，不加还原剂，因而蛋白折叠
1、SDS-PAGE蛋白电泳配胶不凝固怎么办？
（1）可多加过硫酸铵试试
（2）可多加点TEMED来加速凝固
（3）配好胶后放在温箱里凝的快些，环境温度低会影响凝的速度。在冬天灌好胶后放在培养箱里，一般情况下很快就凝了，可以提高效率。
（4）经常出现浓缩胶凝但不成形，非常粘，这是因为C液（浓缩胶缓冲液）的pH值不对，重新配制C液
2、如何提高SDS-PAGE电泳的分辨率?？
充分聚合聚丙烯酰胺。
建议：有些同学会即配即用或在4度冰箱放置，一方面易导致凝固不充分，另一方面可导致SDS结晶。待凝胶在室温凝固后，可在室温下放置一段时间使用，一般凝胶可在室温下保存4天，SDS可水解聚丙烯酰胺。
3、胶聚合速度过慢的原因
重新配了tris缓冲液和acrylamide溶液。最好是定期就重新配制tris缓冲液。
4、样品该怎么处理?
针对样品分离目的的不同，主要有三种处理方法：带有烷基化作用的还原SDS处理、还原SDS处理以及非还原SDS处理。
1、带有烷基化作用的还原SDS处理：碘乙酸胺的烷基化作用很好的并且长期的保护SH基团，得到较窄的谱带;另碘乙酸胺可捕集过量的DTT，以防止银染时的纹理现象。
2、还原SDS处理：在上样buffer中加入SDS和DTT(或Beta巯基乙醇)后，蛋白质构象被解离，电荷被中和，形成SDS与蛋白相结合的分子，在电泳中，只根据分子量来分离。这是电泳最常见的处理方式，样品稀释适当浓度，加入上样Buffer，离心，沸水煮5min，再离心加样。
3、非还原SDS处理：生理体液、血清、尿素等样品，一般来说只用1%SDS，沸水中煮3分钟，不加还原剂，因而蛋白折叠