人结肠癌细胞绿色荧光标记的核心方法、常用细胞株、构建流程、鉴定与应用，以及关键注意事项。
一、常用标记系统与细胞株
核心荧光蛋白：增强型绿色荧光蛋白（eGFP，激发约 488nm，发射约 507nm），比野生型 GFP 荧光更强、更稳定；也有 CAG 启动子驱动的高表达载体。
二、经典荧光标记结肠癌细胞株
HCT116-eGFP/HCT116-GFP：最常用，上皮样，高致瘤性，适合体内成像与药物筛选
HT-29-GFP、LoVo-GFP、SW620-GFP：分别对应不同分化程度与转移潜能的结肠癌细胞，适用不同研究场景。
双标记株：同时表达 GFP（荧光示踪）与荧光素酶（生物发光成像），兼顾体外观察与活体定量。
三、标记构建方法
瞬时转染（脂质体、电转）：快速获得