珍贵细胞株在细胞培养过程中被细菌污染的急救方案！
2026-04-09 14:59阅读：
珍贵细胞株在细胞培养过程中被细菌污染的急救方案！
百欧博伟生物：在细胞培养的过程中，最让人头疼的莫过于细菌污染——尤其是对于那些构建周期长、尚未保种的珍贵细胞株，如Sg单克隆株、耐药株等。一旦污染发生，多年的心血可能毁于一旦。不过别急着放弃！如果你的细胞虽然遭遇大面积污染，但状态尚可、形态未见明显异常，或许还有抢救的机会！
今天，我们就为大家整理出一套针对此类珍贵细胞株细菌污染的“急救方案”。请注意，本方法主要适用于来源困难、构建耗时的珍贵细胞，常规工具细胞或易获取细胞不建议采用此类处理。
一、抢救前准备
PBS
胰酶
可乐必妥（0.5%左氧氟沙星滴眼液，无菌原装，超净台内分装使用）
完全培养基（需经0.22
μm滤膜过滤，防止二次污染）
二、操作步骤
1、弃去原有培养基，用PBS轻轻润洗细胞3–4次，尽量洗去浮游细菌。
2、加入胰酶进行消化。注意控制时间，以细胞未完全脱落而细菌已大量悬浮为宜，通常为正常消化时间的一半。
3、在显微镜下观察，见到细菌呈悬浮流动、细胞仍贴壁时，即可终止消化。
4、不要吹打细胞！将培养皿稍倾斜，用移液器轻轻吸除胰酶。
5、沿壁缓慢加入PBS，轻柔润洗细胞表面，进一步去除残留细菌，重复2–3次。
6、加入完全培养基，温和吹打使细胞脱落，收集细胞悬液，离心后弃去上清。
7、用新鲜全培重悬细胞，并移入新培养器皿，同时按1:500比例加入0.5%左氧氟沙星滴眼液，置于培养箱过夜处理。
8、第二天观察：若培养液无浑浊，说明抢救初步成功；若仍有污染迹象，可尝试将左氧氟沙星以1:1000比例再次加入，继续杀菌。
9、抢救成功后务必及时撤除抗生素，避免长期使用影响细胞状态。
温馨提示
该方法适用于紧急处理细菌污染，但并不能保证100%成功，后续需密切观察细胞状态，并尽快进行保种。预防优于补救，日常实验中的无菌操作才是避免污染的根本！如果你正在为珍贵细胞污染而焦虑，不妨尝试以上方法，或许能帮你挽回一株珍贵的细胞！
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