大鼠肺泡上皮细胞系的关键培养与鉴定要点及应用！
2026-04-13 14:44阅读：
大鼠肺泡上皮细胞系的关键培养与鉴定要点及应用！
大鼠肺泡上皮细胞系的来源、特性、培养条件、鉴定标志物及典型应用，并区分永生化细胞系与原代细胞，方便实验直接选用。
L2 大鼠肺泡 型上皮细胞系
来源：成年大鼠肺组织，经典永生化 AT
细胞系；
形态与特性：贴壁、上皮样，胞质可见空泡（板层体相关）；表达
SP-C（肺表面活性物质蛋白 C）、细胞角蛋白 8/19，可在特定条件下向
型肺泡上皮样细胞分化；裸鼠不致瘤；
推荐培养基：Ham’s F-12K 或 DMEM 高糖 + 10%
FBS + 1% 双抗；37、5% CO；
应用：肺表面活性物质代谢、肺泡修复、肺纤维化、急性肺损伤（ALI/ARDS）模型；
RLE-6TN（大鼠肺上皮 T 抗原阴性）
来源：56 天雄性 F344 大鼠肺泡 型细胞，自
发永生化（无 SV40 T 抗原整合，核染色/PCR 检测阴性）；气道链霉蛋白酶灌注分离；
核心特征：富含脂质包涵体（板层体），表达 SP-C、细胞角蛋白
8/19，分泌趋化因子谱接近原代 AT；非致瘤性；
推荐培养基：F-12 基础培养基 + 10% FBS + 1%
双抗；传代比例 1:2–1:4，首次传代建议 1:2；
应用：肺泡上皮屏障功能、药物/毒物肺毒性、炎症因子释放、肺水转运研究；
其他相关细胞系/原代对照
NR8383：大鼠肺泡巨噬细胞系（常与肺泡上皮共培养，模拟肺微环境炎症）；
原代大鼠肺泡 型上皮细胞（Primary AT）：通过胶原酶/中性蛋白酶消化 + 差速贴壁/免疫磁珠分选获得，SP-C
免疫荧光鉴定纯度 > 90%；功能最接近体内，但增殖能力有限，传代 2–3
次后易分化，适合短期实验；
RPAEpiC（ScienCell）：混合肺泡上皮细胞（含 、 型），角蛋白 18
阳性，用于肺上皮基础功能研究。
关键培养与鉴定要点
培养基与环境：避免频繁更换培养基；L2/RLE-6TN
严禁过度消化（建议 0.05%–0.25% 胰酶 - EDTA，37 2–3
min，及时加含血清培养基终止）；
标志物：AT 核心标志物为 SP-C（surfactant
protein C）、ABCA3、细胞角蛋白 8/19；AT 标志物为 AQP5、T1α；
污染防控：定期检测支原体（PCR/荧光法）；操作全程在二级生物安全柜，培养基添加双抗。
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