在长期保存工作菌株时,我们要如何避免菌株的基因突变?
百欧博伟生物:在长期保存工作菌株时,完全杜绝突变不可能,但能最大限度降低突变概率与表型漂移,核心思路是:减少传代、减少胁迫、减少冻融、规范保存与复苏、定期质控。下面是实验室可落地的全套方案。
一、从根源减少突变:控制传代与菌龄
1、严格控制工作菌株代次
标准菌株(ATCC/CMCC 等)定为0 代。
工作菌株建议≤5 代,超过立即废弃,重新从主种子库复苏制备。
传代越多,突变积累越多,这是最关键一条。
2、使用对数生长期菌体保存
取对数中期菌液制备冻存管,不要用老龄、饥饿、濒死菌体。
饥饿/胁迫状态会激活易错修复,突变率显著上升。
百欧博伟生物:在长期保存工作菌株时,完全杜绝突变不可能,但能最大限度降低突变概率与表型漂移,核心思路是:减少传代、减少胁迫、减少冻融、规范保存与复苏、定期质控。下面是实验室可落地的全套方案。
一、从根源减少突变:控制传代与菌龄
1、严格控制工作菌株代次
标准菌株(ATCC/CMCC 等)定为0 代。
工作菌株建议≤5 代,超过立即废弃,重新从主种子库复苏制备。
传代越多,突变积累越多,这是最关键一条。
2、使用对数生长期菌体保存
取对数中期菌液制备冻存管,不要用老龄、饥饿、濒死菌体。
饥饿/胁迫状态会激活易错修复,突变率显著上升。
