小鼠乳腺上皮细胞（Mouse Mammary Epithelial Cells, MMECs）是构成小鼠乳腺组织的核心功能细胞，也是研究乳腺发育、泌乳生理及乳腺癌的经典体外模型。
一、基本特性
来源：通常分离自分娩后 3-5 天的小鼠乳腺组织。
形态：上皮样，呈多角形、圆形或短梭形；贴壁生长，紧密排列呈铺路石状。
功能：主要执行泌乳功能，在激素诱导下可合成与分泌β- 酪蛋白等乳蛋白。
亚型
腔上皮细胞（Luminal Cells）：表达 CK8/18，负责乳蛋白合成与
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小鼠乳腺上皮细胞（Mouse Mammary Epithelial Cells, MMECs）是构成小鼠乳腺组织的核心功能细胞，也是研究乳腺发育、泌乳生理及乳腺癌的经典体外模型。
一、基本特性
来源：通常分离自分娩后 3-5 天的小鼠乳腺组织。
形态：上皮样，呈多角形、圆形或短梭形；贴壁生长，紧密排列呈铺路石状。
功能：主要执行泌乳功能，在激素诱导下可合成与分泌β- 酪蛋白等乳蛋白。
亚型
腔上皮细胞（Luminal Cells）：表达 CK8/18，负责乳蛋白合成与
分泌。
肌上皮细胞（Myoepithelial Cells）：表达 CK14/α-SMA，具收缩性，协助乳汁排出。
常用细胞系：HC11（最常用，激素响应性强，可分化产乳蛋白）、COMMA-1D、EpH4 等。
二、原代分离与培养（简要流程）
取材：无菌取乳腺，剔除脂肪与结缔组织，PBS 清洗。
剪碎：将组织剪至 < 1mm³ 碎块。
消化：加入胶原酶 ，37摇床消化 1-2 小时。
过滤：40-70μm 细胞筛过滤，去除未消化组织块。
离心洗涤：300×g 离心 5 分钟，弃上清；必要时用红细胞裂解液处理。
接种培养：重悬于专用培养基（含血清、生长因子、抗生素），接种于鼠尾胶原 I包被的培养瓶。
培养条件：37、5% CO饱和湿度培养；2-3 天换液一次。
三、核心科研应用
1、乳腺发育生物学
研究青春期、妊娠、泌乳及退化期的增殖、分化与凋亡调控。
解析雌激素、孕激素、催乳素等激素的信号通路。
2、泌乳机制与乳品科学
探究乳蛋白（酪蛋白、乳清蛋白）的合成、修饰与分泌过程。
评估营养、药物、毒素对泌乳功能的影响。
3、乳腺癌研究
构建癌变转化模型，研究癌基因/抑癌基因功能。
筛选与测试抗肿瘤药物及治疗靶点。
4、干细胞与类器官
分离乳腺干细胞（MaSC），研究其自我更新与分化潜能。
构建乳腺类器官（Organoid），3D 培养高度模拟体内生理结构。
四、培养要点与注意事项
原代细胞：增殖能力有限，通常仅可传 1-2 代，建议尽早实验。
培养基：需使用上皮细胞专用培养基，并添加胰岛素、转铁蛋白、EGF 等添加剂。
基质包被：培养瓶/皿需用鼠尾胶原 I或纤连蛋白包被，以促进贴壁。
污染控制：乳腺组织含大量脂肪，易染支原体，需严格无菌操作并定期检测。
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肌上皮细胞（Myoepithelial Cells）：表达 CK14/α-SMA，具收缩性，协助乳汁排出。
常用细胞系：HC11（最常用，激素响应性强，可分化产乳蛋白）、COMMA-1D、EpH4 等。
二、原代分离与培养（简要流程）
取材：无菌取乳腺，剔除脂肪与结缔组织，PBS 清洗。
剪碎：将组织剪至 < 1mm³ 碎块。
消化：加入胶原酶 ，37摇床消化 1-2 小时。
过滤：40-70μm 细胞筛过滤，去除未消化组织块。
离心洗涤：300×g 离心 5 分钟，弃上清；必要时用红细胞裂解液处理。
接种培养：重悬于专用培养基（含血清、生长因子、抗生素），接种于鼠尾胶原 I包被的培养瓶。
培养条件：37、5% CO饱和湿度培养；2-3 天换液一次。
三、核心科研应用
1、乳腺发育生物学
研究青春期、妊娠、泌乳及退化期的增殖、分化与凋亡调控。
解析雌激素、孕激素、催乳素等激素的信号通路。
2、泌乳机制与乳品科学
探究乳蛋白（酪蛋白、乳清蛋白）的合成、修饰与分泌过程。
评估营养、药物、毒素对泌乳功能的影响。
3、乳腺癌研究
构建癌变转化模型，研究癌基因/抑癌基因功能。
筛选与测试抗肿瘤药物及治疗靶点。
4、干细胞与类器官
分离乳腺干细胞（MaSC），研究其自我更新与分化潜能。
构建乳腺类器官（Organoid），3D 培养高度模拟体内生理结构。
四、培养要点与注意事项
原代细胞：增殖能力有限，通常仅可传 1-2 代，建议尽早实验。
培养基：需使用上皮细胞专用培养基，并添加胰岛素、转铁蛋白、EGF 等添加剂。
基质包被：培养瓶/皿需用鼠尾胶原 I或纤连蛋白包被，以促进贴壁。
污染控制：乳腺组织含大量脂肪，易染支原体，需严格无菌操作并定期检测。
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