鸟氨酸脱羧酶肉汤生化管（简称“鸟氨酸脱羧酶管”）是用于检测细菌是否具有鸟氨酸脱羧酶活性的生化试验工具（如鉴别肠杆菌科细菌，如沙门氏菌、大肠杆菌等）。其原理是：若细菌能产生鸟氨酸脱羧酶，可分解培养基中的鸟氨酸产生胺类物质，使培养基 pH 升高，酚红指示剂（培养基含酚红）由橙红色变为紫红色；若不产生该酶，培养基则保持橙红色或因细菌分解葡萄糖产酸变为黄色。
一、使用前准备
1、检查培养基状态
外观：液体培养基应澄清透明，无浑浊、沉淀、霉斑（若有异常，可能污染，需废弃）。
新浪博客
鸟氨酸脱羧酶肉汤生化管（简称“鸟氨酸脱羧酶管”）是用于检测细菌是否具有鸟氨酸脱羧酶活性的生化试验工具（如鉴别肠杆菌科细菌，如沙门氏菌、大肠杆菌等）。其原理是：若细菌能产生鸟氨酸脱羧酶，可分解培养基中的鸟氨酸产生胺类物质，使培养基 pH 升高，酚红指示剂（培养基含酚红）由橙红色变为紫红色；若不产生该酶，培养基则保持橙红色或因细菌分解葡萄糖产酸变为黄色。
一、使用前准备
1、检查培养基状态
外观：液体培养基应澄清透明，无浑浊、沉淀、霉斑（若有异常，可能污染，需废弃）。
颜色：正常为橙红色（pH
6.8-7.2），若变黄（过酸）或变紫（过碱），可能变质，不可使用。
无菌性：未接种状态下无任何生长迹象（若有浑浊，说明灭菌不彻底或储存污染）。
2、样品准备
待检测细菌需为纯培养物（从平板上挑取单个菌落，避免杂菌干扰结果）。
建议挑取新鲜培养（18-24 小时）的菌落，活性较高，反应更明显。
3、辅助工具
灭菌接种环、酒精灯、35-37恒温培养箱（需稳定控温）。
二、操作步骤（核心：接种 + 创造厌氧环境）
鸟氨酸脱羧酶反应需在厌氧条件下进行（有氧环境会抑制酶活性），因此接种后需通过“覆盖液体石蜡”隔绝空气，具体步骤：
1、接种
用灭菌接种环挑取大量纯菌落（比普通生化试验稍多，确保细菌浓度足够），伸入鸟氨酸脱羧酶管底部，轻轻研磨并搅动培养基（使细菌充分分散），避免接种环触碰管口（防止污染）。
若为斜面培养基（部分生化管为斜面），则在斜面上划线接种，确保菌量充足。
2、创造厌氧环境
接种后，沿管壁缓慢加入灭菌液体石蜡（厚度约 0.5-1cm），完全覆盖培养基液面（石蜡需提前 121灭菌 20 分钟，避免污染）。
目的：阻止空气进入培养基，满足脱羧酶反应的厌氧需求（若石蜡未覆盖完全，有氧环境可能导致假阴性）。
3、培养
放入 35-37恒温培养箱，培养18-24 小时（多数细菌在此时间内可显色）。
若结果不明显（仍为橙红色），可延长至48 小时（部分细菌反应较慢），但超过 48 小时需注意：若杂菌污染，可能导致颜色异常。
三、结果判断（关键：颜色变化）
以“培养基颜色”和“液体石蜡下方的培养基状态”为判断依据，需排除液体石蜡层本身的干扰（只看石蜡下方的培养基）：
1、阳性结果
颜色：石蜡下方的培养基变为紫红色（鸟氨酸被脱羧产生胺，pH 升高，酚红在碱性条件下显紫红色）。
说明：细菌具有鸟氨酸脱羧酶活性（如沙门氏菌多数为阳性）。
2、阴性结果
颜色：石蜡下方的培养基保持橙红色，或因细菌分解葡萄糖产酸变为黄色（无脱羧酶，细菌仅利用葡萄糖产酸，pH 降低）。
说明：细菌无鸟氨酸脱羧酶活性（如大肠杆菌多数为阴性）。
3、无效结果
若培养基浑浊且颜色杂乱（如局部黄、局部紫），可能是杂菌污染（需重新接种纯培养物）。
若液体石蜡未覆盖完全，液面上方培养基变紫、下方不变，可能是有氧环境干扰，结果不可信，需重做。
四、注意事项（避免结果误差）
菌量充足：接种菌量不足会导致反应缓慢或假阴性，需挑取“足量单个菌落”。
石蜡覆盖完整：必须完全覆盖液面，若石蜡层有气泡或未没过培养基，需补加灭菌石蜡。
培养时间：不可过早判断（18 小时内可能反应未完成），也不可过晚（超过 48 小时可能因细菌代谢产物积累导致颜色异常）。
对照设置：建议同时做“阴性对照”（如已知鸟氨酸脱羧酶阴性的大肠杆菌）和“阳性对照”（如已知阳性的伤寒沙门氏菌），确保试验系统可靠。
储存影响：培养基需按说明书储存（通常 2-8冷藏，避光），过期或变质（如颜色异常）的生化管不可使用。
通过以上步骤，可准确检测细菌的鸟氨酸脱羧酶活性，为细菌鉴定提供关键生化指标。核心是“保证厌氧环境”和“观察颜色变化”，操作时需严格无菌操作，避免污染干扰结果。
北京百欧博伟生物技术有限公司的微生物菌种查询网提供微生物菌种保藏、测序、购买等服务,是中国微生物菌种保藏中心的服务平台，并且是集微生物菌种、菌种,ATCC菌种、细胞、培养基为一体的大型微生物查询类网站，自设设备及技术的微生物菌种保藏中心！欢迎广大客户来询！
无菌性：未接种状态下无任何生长迹象（若有浑浊，说明灭菌不彻底或储存污染）。
2、样品准备
待检测细菌需为纯培养物（从平板上挑取单个菌落，避免杂菌干扰结果）。
建议挑取新鲜培养（18-24 小时）的菌落，活性较高，反应更明显。
3、辅助工具
灭菌接种环、酒精灯、35-37恒温培养箱（需稳定控温）。
二、操作步骤（核心：接种 + 创造厌氧环境）
鸟氨酸脱羧酶反应需在厌氧条件下进行（有氧环境会抑制酶活性），因此接种后需通过“覆盖液体石蜡”隔绝空气，具体步骤：
1、接种
用灭菌接种环挑取大量纯菌落（比普通生化试验稍多，确保细菌浓度足够），伸入鸟氨酸脱羧酶管底部，轻轻研磨并搅动培养基（使细菌充分分散），避免接种环触碰管口（防止污染）。
若为斜面培养基（部分生化管为斜面），则在斜面上划线接种，确保菌量充足。
2、创造厌氧环境
接种后，沿管壁缓慢加入灭菌液体石蜡（厚度约 0.5-1cm），完全覆盖培养基液面（石蜡需提前 121灭菌 20 分钟，避免污染）。
目的：阻止空气进入培养基，满足脱羧酶反应的厌氧需求（若石蜡未覆盖完全，有氧环境可能导致假阴性）。
3、培养
放入 35-37恒温培养箱，培养18-24 小时（多数细菌在此时间内可显色）。
若结果不明显（仍为橙红色），可延长至48 小时（部分细菌反应较慢），但超过 48 小时需注意：若杂菌污染，可能导致颜色异常。
三、结果判断（关键：颜色变化）
以“培养基颜色”和“液体石蜡下方的培养基状态”为判断依据，需排除液体石蜡层本身的干扰（只看石蜡下方的培养基）：
1、阳性结果
颜色：石蜡下方的培养基变为紫红色（鸟氨酸被脱羧产生胺，pH 升高，酚红在碱性条件下显紫红色）。
说明：细菌具有鸟氨酸脱羧酶活性（如沙门氏菌多数为阳性）。
2、阴性结果
颜色：石蜡下方的培养基保持橙红色，或因细菌分解葡萄糖产酸变为黄色（无脱羧酶，细菌仅利用葡萄糖产酸，pH 降低）。
说明：细菌无鸟氨酸脱羧酶活性（如大肠杆菌多数为阴性）。
3、无效结果
若培养基浑浊且颜色杂乱（如局部黄、局部紫），可能是杂菌污染（需重新接种纯培养物）。
若液体石蜡未覆盖完全，液面上方培养基变紫、下方不变，可能是有氧环境干扰，结果不可信，需重做。
四、注意事项（避免结果误差）
菌量充足：接种菌量不足会导致反应缓慢或假阴性，需挑取“足量单个菌落”。
石蜡覆盖完整：必须完全覆盖液面，若石蜡层有气泡或未没过培养基，需补加灭菌石蜡。
培养时间：不可过早判断（18 小时内可能反应未完成），也不可过晚（超过 48 小时可能因细菌代谢产物积累导致颜色异常）。
对照设置：建议同时做“阴性对照”（如已知鸟氨酸脱羧酶阴性的大肠杆菌）和“阳性对照”（如已知阳性的伤寒沙门氏菌），确保试验系统可靠。
储存影响：培养基需按说明书储存（通常 2-8冷藏，避光），过期或变质（如颜色异常）的生化管不可使用。
通过以上步骤，可准确检测细菌的鸟氨酸脱羧酶活性，为细菌鉴定提供关键生化指标。核心是“保证厌氧环境”和“观察颜色变化”，操作时需严格无菌操作，避免污染干扰结果。
北京百欧博伟生物技术有限公司的微生物菌种查询网提供微生物菌种保藏、测序、购买等服务,是中国微生物菌种保藏中心的服务平台，并且是集微生物菌种、菌种,ATCC菌种、细胞、培养基为一体的大型微生物查询类网站，自设设备及技术的微生物菌种保藏中心！欢迎广大客户来询！