新浪博客

微生物实验中鉴定药敏分析系统如何进行内部质量控制？

2026-06-01 15:19阅读：

http://blog.sina.cn/dpool/blog/u/7058810482

微生物实验中鉴定药敏分析系统如何进行内部质量控制？





百欧博伟生物：微生物鉴定药敏分析系统的内部质量控制（IQC）是确保检测结果稳定可靠的核心环节，通过对标准菌株、试剂、仪器及操作流程的定期验证，及时发现并纠正系统偏差。具体实施方法如下：

一、制定明确的质控计划

根据仪器说明书、临床实验室标准及实验室需求，制定标准化质控计划，明确：

质控频率：如每日、每周、每月或每批次试剂更换后；

质控对象：包括鉴定系统、药敏系统、关键试剂（如鉴定卡、药敏板）等；

质控菌株：选择国际公认的标准菌株；

可接受范围：依据权威标准设定结果合格阈值；

失控处理流程：明确当质控结果超出范围时的排查和纠正步骤。

二、标准菌株的选择与应用

标准菌株是内部质控的“金标准”，需具备遗传稳定性好、生化
反应和耐药表型明确的特点，常用菌株包括：

微生物类型 常用标准菌株（ATCC 编号） 质控目的

革兰阴性菌 大肠埃希菌 25922 验证需氧菌鉴定准确性、常规药敏试验

革兰阴性菌 肺炎克雷伯菌 700603 验证 ESBL（超广谱 β- 内酰胺酶）检测能力

革兰阴性菌 铜绿假单胞菌 27853 验证非发酵菌鉴定及药敏

革兰阳性菌 金黄色葡萄球菌 25923（敏感株） 验证革兰阳性菌鉴定及药敏

革兰阳性菌 金黄色葡萄球菌 43300（MRSA） 验证耐甲氧西林葡萄球菌检测能力

革兰阳性菌 粪肠球菌 29212 验证肠球菌鉴定及万古霉素药敏

真菌 白色念珠菌 90028 验证酵母样真菌鉴定及抗真菌药敏

使用要求：

标准菌株需从正规渠道获取（如 ATCC、CMCC），低温冷冻保存（-70或冻干），避免反复传代导致表型变异；

每次质控前需复苏菌株，经纯培养（18-24 小时，对数生长期）后使用，确保菌落形态和活性稳定。

三、鉴定系统的内部质控

通过标准菌株验证系统对微生物种属的识别能力，具体步骤：

菌悬液制备：将标准菌株制成 0.5 麦氏浓度的菌悬液（符合仪器要求）；

加载鉴定卡：按操作规范将菌悬液接种至鉴定卡，放入系统孵育；

结果判读：

要求鉴定结果与标准菌株的种属一致（如大肠埃希菌 25922 需明确鉴定为Escherichia coli）；

系统给出的鉴定可信度需≥95%（部分苛养菌可适当放宽至 90%）；

若鉴定错误或可信度不足，需排查原因（如菌悬液浓度异常、鉴定卡失效、仪器数据库未更新）。

四、药敏系统的内部质控

验证系统对药物敏感性判定的准确性，核心是确保 MIC（最低抑菌浓度）或抑菌环直径在标准范围内，步骤：

药敏试验操作：用标准菌株的 0.5 麦氏菌悬液接种药敏板（或纸片扩散法的 MH 琼脂），按仪器要求孵育；

结果对比：

药敏结果需符合 CLSI、EUCAST 等标准的折点（如大肠埃希菌 25923 对氨苄西林的 MIC 应≤8μg/mL，判定为“敏感”）；

若为纸片扩散法，抑菌环直径需在标准区间内（如金黄色葡萄球菌 25923 对青霉素的抑菌环直径应≥29mm）；

耐药机制验证：对特殊耐药株，需确认系统能正确识别其耐药表型。

五、试剂与耗材的质控

鉴定卡/药敏板：

每批次新试剂启用前，用标准菌株测试 1-2 株，验证其活性（如生化底物是否有效、抗菌药物是否稳定）；

记录试剂批号、有效期、储存条件，避免使用过期或变质试剂（如药敏板中抗菌药物结晶、鉴定卡长菌）。

培养基与稀释液：

自制或商用培养基需验证无菌性（孵育后无杂菌生长）、促生长能力（标准菌株生长良好）和一致性（如 MH 琼脂的 pH、厚度符合要求）。

六、仪器性能的日常监控

孵育温度：每日监测系统孵育模块的实际温度，确保与设定温度一致（误差≤±1），避免温度偏差影响微生物生长或反应速率；

加样准确性：定期用标准溶液验证加样体积（误差需≤±5%），防止加样过多/过少导致结果偏差；

光路与读数系统：用标准浊度管或比色皿校准比浊仪、吸光度检测器，确保对菌液浓度或反应产物的检测精度。

七、失控处理与记录

失控判定：当标准菌株的鉴定结果错误、药敏结果超出标准范围，或仪器参数异常时，判定为“失控”；

排查流程：

优先检查操作是否规范（如菌悬液浓度、接种步骤）；

验证试剂是否有效（如更换新批次鉴定卡重试）；

校准仪器关键模块（如温度、光路）；

若为系统软件问题，联系厂商更新数据库或判读规则。

记录与追溯：

建立质控日志，详细记录每次质控的菌株、试剂批号、结果、操作人员及失控处理过程；

定期回顾质控数据，分析趋势性偏差，制定预防措施。

八、总结

内部质量控制的核心是通过标准菌株验证 + 全流程监控，确保微生物鉴定药敏分析系统在鉴定准确性、药敏判读一致性、仪器稳定性等方面符合临床要求。只有持续执行规范化的质控流程，才能为病原学诊断和抗菌药物合理使用提供可靠依据。

北京百欧博伟生物技术有限公司的微生物菌种查询网提供微生物菌种保藏、测序、购买等服务,是中国微生物菌种保藏中心的服务平台，并且是集微生物菌种、菌种,ATCC菌种、细胞、培养基为一体的大型微生物查询类网站，自设设备及技术的微生物菌种保藏中心！欢迎广大客户来询！
微生物实验中鉴定药敏分析系统如何进行内部质量控制？

我的更多文章

下载客户端阅读体验更佳

APP专享