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副溶血性弧菌的培养特性与操作要点及应用与质控提示!

2026-08-04 14:38阅读:
副溶血性弧菌的培养特性与操作要点及应用与质控提示!





副溶血性弧菌是革兰氏阴性嗜盐弧菌,兼性厌氧,营养要求不高,核心培养特性为嗜盐(无盐不生长)、最适 37与 pH 7.4-8.0、在 TCBS 呈绿色菌落,以下是详细要点。

一、核心生长条件

参数 范围 最适 备注

NaCl 浓度 0.5%–10% 3%–3.5%(30–35 g/L) 无盐不生长,>10% 抑制生长

温度 8–44 37 4不生长,5–10可存活
pan >
pH 7.0–9.5 7.4–8.0 <5.0 不生长,耐碱不耐酸

氧气 需氧为主,兼性厌氧 有氧 厌氧下生长缓慢,液体表面易形成菌膜

水分活度(aw) ≥0.948 <0.948 不生长

二、液体培养表现

3% NaCl 肉汤:37培养 18–24 h,多为均匀混浊,表面形成菌膜;R 型菌株可见沉淀;动力强,单鞭毛,呈“鱼群样”运动。

硫代硫酸盐 - 柠檬酸盐 - 胆盐 - 蔗糖(TCBS)增菌液:混浊生长,表面菌膜明显,非选择性增菌常用。

三、固体培养基菌落特征

TCBS 琼脂(选择性 + 鉴别):圆形、半透明、光滑湿润,直径 2–3 mm,绿色(不发酵蔗糖),质感似口香糖,为典型菌落形态。

3.5% NaCl 琼脂:隆起、光滑湿润、不透明,边缘可蔓延不整齐,无色素。

羊血琼脂:2–3 mm 圆形、灰白色、湿润隆起,部分菌株呈 β 溶血或 α 溶血。

SS 琼脂:多不生长,少数为 1–2 mm 扁平无色半透明,不易挑起、呈粘丝状。

氯化钠蔗糖琼脂:绿色菌落(不发酵蔗糖),用于与发酵蔗糖的弧菌区分。

四、培养操作要点

培养基需添加 3% NaCl,避免无盐或高盐(>10%)抑制。

增菌用 3% NaCl 碱性蛋白胨水(pH 8.0–8.5),37 6–8 h 后转种 TCBS。

分离平板 37 18–24 h 观察,TCBS 绿色菌落优先纯化鉴定。

厌氧培养需延长至 48 h 以上,且生长较弱,不推荐常规使用。

质控提示:标准菌株(如 ATCC 17802)在 TCBS 应呈绿色菌落,无盐平板不生长,氧化酶阳性,以验证培养基与条件有效性。

五、应用与质控提示

食品检测:优先用 TCBS 筛选绿色菌落,结合生化(氧化酶 +、赖氨酸脱羧酶 +、不发酵蔗糖)与血清分型确认。

临床分离:注意血琼脂溶血株与非溶血株的致病性差异。

实验室质控:每批培养基做阳性(ATCC 17802)与阴性(如大肠杆菌)对照,确保选择性与鉴别性有效。

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