蜡样芽胞杆菌选择性琼脂基础是食品微生物检测中分离和鉴定蜡样芽胞杆菌的专用培养基,符合GB 4789.14-2014《食品安全国家标准 食品微生物学检验 蜡样芽胞杆菌检验》 等行业标准。
一、培养基原理
该培养基的选择性和鉴别性由基础成分、选择性试剂、鉴别性底物共同实现,核心原理如下:
1、选择性抑制机制
培养基中添加 多粘菌素 B 或 多粘菌素 E,这类抗生素能作用于革兰氏阴性菌的细胞膜,破坏其结构完整性,从而抑制绝大多数革兰氏阴性杂菌的生长;而蜡样芽胞杆菌作为革兰氏阳性菌,对多粘菌素具有抗性,可在培养基上正常生长。
2、鉴别性底物反应
甘露醇(碳源):蜡样芽胞杆菌不发酵甘露醇,其菌落周围不会产生酸性物质;而其他能发酵甘露醇的杂菌(如葡萄球菌)会使培养基中的酸碱指示剂变色。
卵黄(卵磷脂底物):蜡样芽胞杆菌可产生卵磷脂酶,该酶能分解卵黄中的卵磷脂,生成不溶性的甘油酯和脂肪酸,在菌落周围形成特征性的沉淀环。
酸碱指示剂(酚红):酚红的变色范围为 pH 6.8(黄)~ 8.4(红)。不发酵甘露醇的菌株,菌落周围培养基保持中性或弱碱性,呈红色;发酵甘露醇的菌株会产酸,使菌落周围培养基变为黄色。
二、实验现象
将待检样品(如食品匀浆稀释液)接种于 MYP 琼脂平板,经 30 ± 1 培养 24 h ~ 48 h 后,观察菌落形态及周围培养基变化,典型实验现象如下:
1、蜡样芽胞杆菌的典型菌落
菌落形态:呈乳白色至淡粉红色,不透明,表面粗糙,边缘不整齐,类似毛玻璃或蜡状,直径约 2 mm ~ 5 mm。
特征性沉淀环:菌落周围会出现一圈 宽约 2 mm ~ 5 mm 的乳白色浑浊环(卵磷脂酶分解卵黄的产物),此为蜡样芽胞杆菌的关键鉴别特
