探究酶的活性实验中，为什么有的不可以用斐林试剂。有的不可以选择淀粉酶？
2011-10-07 20:14阅读：
探究酶的活性实验中，为什么有的不可以用斐林试剂。有的不可以选择淀粉酶？
2009-09-17 10:01:24|
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探究酶的活性实验中，为什么有的不可以用斐林试剂。有的不可以选择淀粉酶？
一．探究温度对淀粉酶活性的影响时，可不可以用斐林试剂？
答案不可以，理由是0
℃（冰水中）酶的活性降低，而用斐林试剂的处理条件是需要水浴加热，酶在低温下酶活性降低，但随着温度的回升，酶的活性逐渐恢复，而结果已经失去了参考价值。
二、探究PH值对酶活性的影响时不可以选择淀粉酶，为什么？
答案不可以。理由是，在鉴定酶的活性时，如果用碘液鉴定底物淀粉的含量，则碘会与碱性环境下的NaOH反应生成NaI，如果用斐林试剂鉴定产物还原糖，由于斐林试剂作用的条件是碱性环境，所以无法监测PH为酸性条件的酶的活性。
三．同为探究淀粉酶的作用效果，指示剂选择为何有区别？
在“探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用”和“温度对酶活性的影响”实验中，选择指示剂时却截然不同，前者选择斐林试剂，后者选用碘液。原因在于：
“探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用”是为了确定被检物质中是否有还原糖的存在，进而确定反应是否进行，从而说明淀粉酶只对淀粉起催化作用，对蔗糖不起作用。如果选用碘液，只能说明淀粉酶对淀粉起催化作用，不能说明淀粉酶对蔗糖不起作用。故只能选择斐林试剂。
“温度
对酶活性的影响”是要观察不同温度对酶活性的影响，不是要证明有没有反应产物——还原糖出现，选用碘液作为指示剂，可通过淀粉溶液褪色过程，直观地显示出不同温度条件下，反应的动态变化过程。当然，在教材所选温度0
℃（冰水中）、60 ℃和100 ℃（沸水中）的条件下，选择斐林试剂时可得出只有60
℃的温度条件下处理的淀粉溶液才有砖红色沉淀生成，即反应在60
℃时能够进行，其它两温度条件下无砖红色沉淀生成，反应不能进行。因此也可以选用斐林试剂作为指示剂，但却不能观察反应的动态变化过程。两相比较，选择碘液更好。试想，如果将温度这一条件设置得更密集点儿，如0
℃、10 ℃、20 ℃、…、60 ℃、…、100
℃，此时就只能选择碘液，而不可选择斐林试剂了，因为，其它温度条件下也会有砖红色沉淀生成的，而选用碘液却可以看到随淀粉分解反应的进行，蓝色逐渐消失的过程。
四、在淀粉酶溶液与淀粉溶液混合前将需要混合的酶溶液与淀粉溶液在相同温度的条件下处理5分钟，即做同温处理，原因何在？
原因在于，酶的催化效率具有高效性，如不先做同温处理，而是先混合后处理（调温），可能出现因调温过程中反应的进行影响实验结果。同理，如要“探索PH值对酶活性的影响”，也应“先调整底物溶液至某些设定的PH值，后加入酶溶液”，避免“加入之后调”可能带来的误差。
五、在探究温度对酶活性的影响时，处理顺序很关键，必须将底物或者酶在不同温度下处理后才能将其混合。如果将底物与酶处理前混合，由于酶具有高效性，混合反应已经完成，则变量的处理就失去了意义。
(说明三、四内容为网上搜索)
