纸电泳和醋酸纤维薄膜电泳
2007-05-19 13:37阅读：
（1）纸电泳
纸电泳是用滤纸作支持介质的一种早期电泳技术。尽管分辨率比凝胶介质差，但由于操作简单，所以仍有很多应用，特别是在血清样品的临床检测和病毒分析等方面有重要用途。
纸电泳使用水平电泳槽。分离氨基酸和核苷酸时常用pH 2～3.5的酸性缓冲液，分离蛋白质时常用碱性缓冲液。选用的滤纸必须厚度均匀，常用国产新华滤纸和进口Whatman 1号滤纸。点样位置在滤纸一端距纸边5cm～10cm处。样品可点成园形或长条形，而以长条形的分离效果较好。点样量为5mg～100mg或5
ml～10ml。点样方法有干点法和湿点法。湿点法是在点样前将滤纸用缓冲液浸湿，样品液要求较浓，不亦多次点样。干点法是在点样后再用缓冲液和喷雾器将滤纸喷湿，点样时可用吹风机吹干后多次点样，因而可以用较稀的样品。电泳时要选择好正、负极，电压通常使用2～10
V/cm的低压电泳，电泳时间较长。对于氨基酸和肽类等小分子物质，可使用50～200
V/cm的高压电泳，电泳时间可以大大缩短，但必须解决电泳时的冷却问题，并要注意安全。
电泳完毕记下滤纸的有效使用长度，然后烘干，用适当显色剂显色。定量测定的方法有洗脱法和光密度法。洗脱法是将样品区带剪下，用适当洗脱剂洗脱后进行比色测定。光密度法是将染色后的干滤纸用光密度计直接定量测定各样品电泳区带的含量。
（2）醋酸纤维薄膜电泳
醋酸纤维薄膜电泳与纸电泳相似，以醋酸纤维薄膜作为支持介质。将纤维素的羟基乙酰化为醋酸酯，溶于丙酮后涂布成0.1～0.15mm厚度并具有均一细密微孔的薄膜。醋酸纤维薄膜电泳与纸电泳相比有以下优点：①. 醋酸纤维薄膜对蛋白质样品吸附极少，无“拖尾”现象，染色后蛋白质区带清晰。②.
快速省时。由于醋酸纤维薄膜亲水性比滤纸小，吸水少，电渗作用小，电泳时大部分电流由样品传导，所以分离速度快，电泳时间短，完成全部电泳操作只需90 min左右。③. 灵敏度高，样品用量少。血清蛋白电泳仅需 2ml
血清，点样量甚至少到0.
1ml蛋白样品也可以得到清晰的电泳区带。临床医学常用于检测微量异常蛋白的改变。④.
应用面广。可用于那些纸电泳不易分离的样品，如胎儿甲种球蛋白、溶菌酶、胰岛素、组蛋白等。⑤.
醋酸纤维薄膜电泳染色后，用乙酸、乙醇混合液浸泡后可制成透明的薄膜，有利于光密度计和分光光度计扫描定量及长期保存。
由于醋酸纤维薄膜电泳操作简单、快速、价廉，目前已广泛用于分析检测血浆蛋白、脂蛋白、糖蛋白、胎儿甲种球蛋白、体液、脊髓液、脱氢酶、多肽、核酸及其他生物大分子，为心血管疾病、肝硬化及某些癌症的鉴别诊断提供了可靠的依据，因而已成为医学和临床检验的常规技术。
