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95%[54]。2002年A
Hsu等通过页硅酸盐凝胶法包埋固定化Pseudomonas
cepacia脂肪酶用于催化地沟油生产生物柴油，在水的活度小于0.5的无溶剂体系中，48小时后生物柴油的转化率达到了98%[55]。
催化合成生物柴油研究的各脂肪酶：酵母脂肪酶、根霉脂肪酶[56]、毛霉脂肪酶[57]等真菌脂肪酶与洋葱假单胞菌和荧光假单胞菌等细菌脂肪酶，它们的优缺点如下：
（1）酵母脂肪酶、根霉脂肪酶等真菌脂肪酶
优点：① 反应条件温和；② 转化率高
缺点：① 酶对甲醇和温度的稳定性差，需要分批次加入甲醇，工艺烦琐；② 整个反应通常要在72h后才能完成，反应时间过长；③ 酶的制备成本高；④ 反应需要在溶剂中进行，造成最后的产物分离困难。
（2）洋葱假单胞菌和荧光假单胞菌脂肪酶等细菌脂肪酶
优点：① 反应条件温和；② 转化率高；③ 酶对温度和甲醇的稳定性好，可以一次性加入甲醇；④ 反应速度快；⑤ 无溶剂反应体系，反应产物静置就可以分离出来。
缺点：① 酶的制备成本高。
从以上各种脂肪酶合成生物柴油的比较来看，均具有条件温和，醇用量小、转化率高、无污染排放等优点。但酶制剂的成本过高，限制了工业上大规模化生产生物柴油。
催化合成生物柴油研究的各脂肪酶：酵母脂肪酶、根霉脂肪酶[56]、毛霉脂肪酶[57]等真菌脂肪酶与洋葱假单胞菌和荧光假单胞菌等细菌脂肪酶，它们的优缺点如下：
（1）酵母脂肪酶、根霉脂肪酶等真菌脂肪酶
优点：① 反应条件温和；② 转化率高
缺点：① 酶对甲醇和温度的稳定性差，需要分批次加入甲醇，工艺烦琐；② 整个反应通常要在72h后才能完成，反应时间过长；③ 酶的制备成本高；④ 反应需要在溶剂中进行，造成最后的产物分离困难。
（2）洋葱假单胞菌和荧光假单胞菌脂肪酶等细菌脂肪酶
优点：① 反应条件温和；② 转化率高；③ 酶对温度和甲醇的稳定性好，可以一次性加入甲醇；④ 反应速度快；⑤ 无溶剂反应体系，反应产物静置就可以分离出来。
缺点：① 酶的制备成本高。
从以上各种脂肪酶合成生物柴油的比较来看，均具有条件温和，醇用量小、转化率高、无污染排放等优点。但酶制剂的成本过高，限制了工业上大规模化生产生物柴油。