香豆素·显色反应

香豆素·显色反应
1. 异羟肟酸铁反应 在碱性条件下，内酯开环，与盐酸羟胺中的羟基缩合生成异羟肟酸，然后在酸性条件下再与Fe³⁺络合→ 红色。
2. 酚羟基反应 有酚羟基取代的香豆素类在水溶液中可与FeCl₃试剂络合而产生绿色至墨绿色沉淀。
若酚羟基的邻对位无取代时，可与重氮化试剂反应→ 红色至紫红色。可以判断取代酚羟基的邻对位有无取代
3. Gibb's反应 与酚羟基对位的活泼氢缩合→ 蓝色。若C₆位无取代→ 蓝色，若有取代则负反应。判断C₆位有无取代基
4. Emerson反应 与酚羟基对位的活泼氢反应→ 红色。用以判断C₆位有无取代基存在。
香豆素·提取分离 游离香豆素多具有亲脂性，而香豆素苷类因极性增大而具亲水性，由此可选择合适的溶剂进行提取。常用方法有：
·溶剂提取法：利用极性由小到大的溶剂顺次萃取时，各萃取液浓缩后都有可能获得结晶，再结合其他分离方法进行分离。
·碱溶酸沉法：香豆素类多呈中性或弱酸性，可被热的稀碱液所皂化溶解，加酸酸化后可降低在水中的溶解度，可析出沉淀或被乙醚溶解而与杂质分离。
·水蒸汽蒸馏法：小分子的香豆素具有挥发性，可用水蒸汽蒸馏法进行提取，提取液经适当浓缩后可析出香豆素结晶。本法提取方法简便，纯度也较高。
·色谱分离法：常用于结构相近的香豆素化合物。柱色谱分离~慎用碱性氧化铝。
香豆素·结构测定
·紫外光谱（UV）：未取代的香豆素可在λ_max274nm(logε4.03)和311nm（logε3.72）有两个吸收峰，分别为苯环和α-吡喃酮结构所引起。取代基的导入常引起吸收峰位置的变化。一般烷基取代影响很小，而羟基导入常使吸收峰红移。其峰位常随测试溶液的酸碱性而变化。
·红外光谱（IR）：香豆素类成分属于苯骈α-吡喃酮，因此在红外光谱中应有α-吡喃酮的吸收峰1745～1715cm