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纸层析法分离叶绿体中的色素

2011-02-19 14:58阅读:
实验:提取和分离叶绿体中的色素
1、原理:
叶绿体中的色素能溶解于有机溶剂(如丙酮、无水乙醇等)。
叶绿体中的色素在层析液中的溶解度不同,溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快;反之则慢。
2、过程:(见书P61)
3、结果:色素在滤纸条上的分布如下图:
纸层析法分离叶绿体中的色素

(橙黄色) 最快、最窄

(黄 色)

(蓝绿色) 最宽
(黄绿色) 最慢


【特别提示】
①从色素带的宽度知色素含量的多少依次为:叶绿素a>叶绿素b>叶黄素>胡萝卜素。
②从色素带的位置知再层析液中溶解度大小依次为:胡萝卜素>叶黄素>叶绿素a >叶绿素b。
③在滤纸上距离最近的两条色素带是叶绿素a 和叶绿素b,最远的是胡萝卜素和叶黄素。
4、实验疑难点拨:
(1) 丙酮(或无水乙醇)的用途是溶解(提取)叶绿体中的色素。
(2) 石英砂(二氧化硅
)的作用是为了研磨充分。
(3) 碳酸钙的作用是防止研磨过程中色素被破坏。
(4) 层析液的的用途是分离叶绿体中的色素。
5、实验成功的关键:
(1)叶片新鲜,颜色要深绿,含有较多色素。
(2)研磨要迅速、充分。叶绿素不稳定,易被细胞内有机酸破坏。充分研磨使叶绿体完全破裂,提取较多的色素。
(3)滤液细线要画得细而直,以防止色素带重叠。且要重复2-3次,以增加色素量,使色素带更加清晰。
(4)滤液细线不能触及层析液,否则滤液细线上的色素会溶解到层析液中,滤纸条上得不到色素带。
三、叶绿体中的色素
1、位置:叶绿体中的色素存在于叶绿体类囊体薄膜上。
2、种类: 叶绿素:叶绿素a(蓝绿色),叶绿素b(黄绿色)
类胡萝卜素:胡萝卜素(橙黄色),叶黄素(黄色)
3、功能:叶绿素a和叶绿素b主要吸收红光和蓝紫光;
胡萝卜素和叶黄素主要吸收蓝紫光及保护叶绿素免受强光伤害的作用。
【特别提示】
①叶绿素中的色素只吸收可见光,而对红外光和紫外光等不吸收。
②叶绿素对红光和蓝紫光的吸收量大,类胡萝卜素对蓝紫光吸收量大,但对其他波段的光并非不吸收,只是吸收量较少。
③有色大棚主要透过同色光,其他光被吸收,而无色透明大棚日光中各种色光均能通过,所以光合效率最高。
④叶绿素对绿光吸收最少,所以绿色大棚光合效率最低。

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