糖含量测定:蒽酮-硫酸法
2009-02-22 13:57阅读:
糖类遇浓硫酸脱水生成糠醛或其衍生物,可与蒽酮试剂缩合产生顔色物质,于620nm处有最大吸收,显色与多糖含量呈线性关系。
试剂:2g/L蒽酮试剂:溶解2g蒽酮于浓硫酸中,现配使用。
0.1g/L葡萄糖溶液
操作:
1.
制标准曲线:分别取0.1
g/L葡萄糖溶
液0.05、0.10、0.20、0.30、0.40、0、60、0.80ML,用纯水补到1.00ML,分别加入4.00ML蒽酮试剂,迅速浸入冰水浴中冷却,各管加完后一起浸于沸水浴中,封口防蒸发,准确煮沸10分钟,取出用自来水冷却,室温放置10分钟,于620nm处比色。以同样处理的纯水为空白进行比色,以光密度为纵坐标,糖含量微克数为横坐标,得标准曲线(R2>0.995)
2.
测样品含量:取糖浓度50ug/ml左右的样品溶液1.00ML,加入蒽酮试剂,同标准曲线制作之操作,比色测定。根据标准曲线和样品浓度计算含量。