无机磷检测试剂盒（米吐尔钼蓝比色法）
2022-03-18 13:42阅读：
简介：
血清中的无机磷(Inorganic phosphorous)主要由H2PO4-和HPO42-两种磷酸根阴离子组成，世界贸易组织(WHO)推荐的常规检测方法为比色法，我国卫生部临检中心推荐的常规方法为**亚铁钼蓝比色法和米吐尔钼蓝比色法。体内许多重要的物质如某些蛋白质、脂类化合物、核酸、辅酶等都含有磷。在酸碱平衡中，磷酸盐亦具有重要的作用。
伊势久生物无机磷检测试剂盒（米吐尔钼蓝比色法）利用无机磷在酸性条件下与钼酸铵结合生成磷钼酸铵，后者被米吐尔还原成蓝紫色的复合物。通过分光光度计检测610
nm处吸光度值，根据公式计算出无机磷含量。主要用于定量检测无机磷，亦可
用于尿液检测。本试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
组成：
产品名称
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KB021-100T
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Storage
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试剂(A): 磷标准(1mg/ml) 1ml 4
试剂(B):
标准品稀释液 5ml
4 避光 试剂(C): Pi Assay buffer 120ml RT 试剂(D)：米吐尔 2×0.35g RT
避光 试剂(E): ddH2O
5ml RT 说明书 一份
无机磷检测试剂盒（米吐尔钼蓝比色法)
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1ml×2
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4
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试剂(B): 标准品稀释液
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10ml
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4 避光
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试剂(C): Pi Assay
buffer
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240ml
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RT
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试剂(D)：米吐尔
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4×0.35g
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RT 避光
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试剂(E):
ddH2O
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10ml
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RT
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说明书
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一份
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保存条件：
试剂(A): 磷标准(1mg/ml)4保存；试剂(B): 标准品稀释液4避光保存；试剂(C): Pi Assay
buffer、试剂(E):
ddH2O常温保存；试剂(D)：米吐尔常温避光保存。
一年有效。
操作步骤（仅供参考）：
1、
（选做）制备样品：
血浆、血清样品：血浆、血清按照常规方法制备，可以直接用于本试剂盒的测定，-20
冻存，用于Pi的检测。
细胞或组织样品：取恰当细胞或组织进行匀浆，低速离心取上清，-20
冻存，用于Pi的检测。
高浓度样品：如果样品中含有较高浓度的Pi，可以蒸馏水稀释。
（选做）样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度，以便于后续计算单位蛋白重量组织或细胞内的Pi含量。
2、制备磷标准工作液：取适量的磷标准(1
mg/ml)，按磷标准(1
mg/ml)：标准品稀释液=1:24的比例稀释，即获得磷标准工作液(1.292
mmol/L)，-20
冻存，用于Pi的检测。
制备米吐尔钼蓝显色工作液：
3、取1支的米吐尔，充分溶解于50 ml Pi
Assay buffer，即为米吐尔钼蓝显色工作液。配制后的该溶液应4
避光保存，一般建议1周内用完。
4、 Pi检测：按下表操作。
加入物(ml)
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空白光
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标准管
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测试管
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ddH2O
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0.05
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—
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—
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磷标准(1.29
mmol／L)
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—
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0.05
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—
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待测样品
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—
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—
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0.05
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米吐尔钼蓝显色工作液
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2.0
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2.0
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2.0
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5、 混匀，水浴，分光光度计650
nm处检测，比色杯光径1.0
cm，以空白管调零，读取各管吸光度值。
计算:
血清、血浆中无机磷计算公式：磷(mmol/L)=(A测定/A标准)×1.292
组织中磷计算公式：磷(mmol/mg)=(A 测定/A 标准)×1.292/待测样品蛋白浓度(mg/L) 参考区间：
健康成年人血清磷浓度：0.96-1.62
mmol/L(3-5
mg/dl)
儿童血清磷浓度：1.45-2.1
mmol/L(4.5-6.5
mg/dl)
注意事项：
1、
米吐尔钼蓝显色工作液配制完成后，尽快使用，放置过久会导致正常血清液产生轻度浑浊。
2、
如果样品浓度过高，应用蒸馏水稀释后重测，结果乘以稀释倍数。
