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糖原快速染色

2022-03-20 13:41阅读:
简介:
糖原染色是病理学中常规的染色方法之一,McManus1946年最先使用高碘酸-雪夫技术显示黏蛋白,该法常用来显示糖原和其他多糖,该染色试剂盒不仅能够显示糖原,还能显示中性黏液性物质和某些酸性物质以及软骨、垂体、霉菌、真菌、色素、淀粉样物质、基底膜等。过碘酸(又称高碘酸)是一种强氧化剂,它能氧化糖类及有关物质中的12-***基,使之变为二*,*与Schiff试剂能结合成一种品红化合物,产生紫红色。由于高碘酸还可氧化细胞内其他物质,使用时应注意选择好高碘酸浓度和氧化时间,使氧化控制在既能把***基氧化成*基又不至于过氧化,这是很关键的步骤。
BIOISCO糖原PAS快速染色液的特点: 采用BIOISCO特有配方技术,大大增强了染色效果;性能稳定,特异性强;操作简捷。与常规糖原PAS染色试剂盒相比,少了苏木素染细胞核的步骤,大大提高了工作效率。适用于石蜡切片和冰冻切片。  

组成:
产品名称
SCA005-3×100ml
Storage
试剂(A): 过碘酸溶液
100ml
4避光
试剂(B): Schiff Reagent
100ml
4避光
试剂(C): 亚**溶液
100ml
RT
说明书
一份


保存条件:
一年有效。

自备材料:
1、蒸馏水
2、系列乙**

操作步骤(仅供参考)
1、组织固定: 石蜡切片固定于Carnoy固定液较好,可在4下固定以为避免极化。小块组织2~3h,大块组织可以适当延长时间,但不宜超过18h。固定后的组织可直接用95%**浸洗几次,然后入无水**脱水,再透明包埋。 
2、石蜡切片脱蜡入蒸馏水。冰冻切片直接入蒸馏水。 
3、自来水冲洗,蒸馏水浸洗。 
4、入过碘酸溶液,室温氧化。 
5、自来水冲洗,蒸馏水浸洗。 
6、入SchiffReagent, 置于室温阴暗处浸染 (冰冻切片,石蜡切片可适当延长时间)。                  7、在上述操作过程中亚**溶液:蒸馏水按一定的比例配制亚**工作液。入亚**工作液 洗。 
8、自来水冲洗,更换蒸馏水冲洗。 
9、逐级常规**脱水。二**透明,中性树胶封固。  

染色结果:
PAS反应阳性物质( 糖原或多糖)
红色或紫红色
细胞核
蓝色
细胞质、肌纤维、胶原纤维等
深浅不一的红色

备注:颜色深浅很大程度上取决于样品在过碘酸溶液和Schiff Reagent中作用时间的长短。
阴性对照(可选): 
1、取淀粉酶溶解于PBS(pH5.3) ,处理,与其他切片共同入过碘酸溶液。结果应为阴性。 
2(备选方案)取唾液片(过滤后用)处理,与其他切片共同入过碘酸溶液。结果应为阴性。 
3(备选方案)如果对照片采用其自身样本,对照片不经过碘酸溶液这一步,直接入SchiffReagent。结果应为阴性。  

注意事项:
1、 切片脱蜡应尽量干净,否则影响染色效果。 
2、 过碘酸氧化时间不宜过久,氧化时的温度以1822最佳。 
3、 过碘酸溶液和SchiffReagent应置于4密闭保存,提前恢复到室温,避光暗处使用。 
4、 在过碘酸溶液和SchiffReagent中的作用时间非常重要,应该依据切片厚薄、组织的 类别等决定。冷冻切片染色时间尽量要短。  

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