有人问我。为方便解答,写个博客吧。反正很久都没写了。原话是“测RPE细胞中VEGF的表达趋势的,它写着用IHC、Western
Blot、原位杂交还有Elisa四种方法检测,我就没弄明白,这需要做这么多吗?”
首先写免责条款。对于这四项技术,我最了解的是ELISA,其余三项内容都不是很了解。只是花费了15分钟,对自己进行了一下科普,然后又用了三分钟研究什么是VEGF和RPE细胞。所以,我的理解和回答都有可能出现偏差和错误,仅供参考。
RPE细胞的全称是视网膜色素上皮细胞,似乎以这个细胞做模型的人很多。随便一搜,论文、求购信息等等都出来了。
VEGF的全称是血管内皮生长因子,这东西,看到中文名称后,我终于想起来,自己稍微了解一些。肿瘤在生长过程中,首先要给自己建立血液循环通道,所以大量表达这个因子,让肿瘤附近血管密布。有一些大型药厂以此为突破点,希望寻找一个合适的靶向药,阻止肿瘤血管生成,治疗(抑制)肿瘤。又看了一眼度娘百科,告诉我:血管内皮细胞生长因子基因由8 个外显子和7个内含子组成,定位于染色体6p21.3,由于外显子剪切的不同而形成不同的亚型。其中VEGF121、VEGF165和VEGF189在人类表达。
好了,开始正文:
1.IHC Immunohistochemistry,要是告诉我中文名称“免疫组化”,我会恍然大悟的说“哦,久闻大名。”度娘百科告诉我,是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应,对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来,借助显微镜(包括荧光显微镜、电子显微镜)的显像和放大作用,在细胞、亚细胞水平检测各种抗原物质(如蛋白质、多肽、酶、激素、病原体以及受体等)。
2.Western Blot,免疫蛋白印记,Western Blot法采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗。经过PAGE分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如 硝酸纤维素薄膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的 抗体起免疫反应,再与酶或同位素标记的第二抗体起反应,经
首先写免责条款。对于这四项技术,我最了解的是ELISA,其余三项内容都不是很了解。只是花费了15分钟,对自己进行了一下科普,然后又用了三分钟研究什么是VEGF和RPE细胞。所以,我的理解和回答都有可能出现偏差和错误,仅供参考。
RPE细胞的全称是视网膜色素上皮细胞,似乎以这个细胞做模型的人很多。随便一搜,论文、求购信息等等都出来了。
VEGF的全称是血管内皮生长因子,这东西,看到中文名称后,我终于想起来,自己稍微了解一些。肿瘤在生长过程中,首先要给自己建立血液循环通道,所以大量表达这个因子,让肿瘤附近血管密布。有一些大型药厂以此为突破点,希望寻找一个合适的靶向药,阻止肿瘤血管生成,治疗(抑制)肿瘤。又看了一眼度娘百科,告诉我:血管内皮细胞生长因子基因由8 个外显子和7个内含子组成,定位于染色体6p21.3,由于外显子剪切的不同而形成不同的亚型。其中VEGF121、VEGF165和VEGF189在人类表达。
好了,开始正文:
1.IHC Immunohistochemistry,要是告诉我中文名称“免疫组化”,我会恍然大悟的说“哦,久闻大名。”度娘百科告诉我,是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应,对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来,借助显微镜(包括荧光显微镜、电子显微镜)的显像和放大作用,在细胞、亚细胞水平检测各种抗原物质(如蛋白质、多肽、酶、激素、病原体以及受体等)。
2.Western Blot,免疫蛋白印记,Western Blot法采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗。经过PAGE分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如 硝酸纤维素薄膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的 抗体起免疫反应,再与酶或同位素标记的第二抗体起反应,经

