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DNA的粗提取与鉴定 实验过程 实验报告

2013-04-02 16:19阅读:
试剂盒试用报告

基本情况
单位名称
海口市第一中学
申请试剂盒名称
DNA的粗提取与鉴定试剂盒

申请渠道
1.洛阳会议 2.朋友推荐 3.教研组织 4 网络√
试用背景:
写写您的试用背景,让我们了解您的实验条件,以便日后更好的为您服务。
1、有无生物新课标实验室?
2、有无相关仪器配备?
3、是否开展过相关实验?
学校已建有实验室,但尚未开展本实验。仪器已备齐,由于生物组的老师之前都未做过相关实验,若有能有专业人员先对教师进行相关培训,对我们今后的实验开展将大有益处。


试用过程与结果

实验名称:DNA的粗提取与鉴定
实验原理:
1. DNANaCl溶液中的溶解度是随着NaCl的浓度的变化而改变的。 当NaCl的物质的量浓度为0.14
molL,DNA的溶解度最低。利用这一原理,可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出。
  2.DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液。利用这一原理,可以进一步提取出含杂质较少的DNA
  3.DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色,因此,二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。
实验仪器及实验材料:
研钵、天平、漏斗、纱布、烧杯、酒精灯、玻璃棒、试管、试管夹、95%无水乙醇、香蕉
实验步骤(含操作过程照片):
1.材料准备:用天平秤取香蕉20g,将香蕉切成小块放入研钵中(如图①)。
2.制备滤液:从试剂盒中将研磨液取出,取3mL研磨液加入研钵中,与香蕉研磨充分。研磨至半流体状态时,将研磨的香蕉糊用漏斗和一层纱布过滤到烧杯中(如图②)。
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3.提取DNA:在上述香蕉提取液中,加入与滤液体积相等的4℃冷却的95%无水乙醇。静置1-2min,用玻璃棒朝一个方向轻轻搅拌,就会看到大量白色纤维状粘稠物从溶液中析出,用玻璃棒轻轻卷起(如图③)。
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4.鉴定DNA:将试剂盒中的二苯胺试剂B全部取出加入到A中混匀。取两支试管,各加入2mol/LNaCl溶液5m,将丝状物放入其中一支试管中,用玻璃棒搅拌,使丝状物溶解。然后向两支试管中各加入4mL的二苯胺试剂。混合均匀后,沸水浴10min,观察结果(如图④⑤)。
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实验结果(实验结果照片):
实验结果如图:
DNA的粗提取与鉴定 <wbr>实验过程 <wbr>实验报告
实验结果分析:
在沸水浴的条件下,加丝状物的试管(含DNA)遇二苯胺被染成蓝色,而对照组无变色现象。实验过程中,由于香蕉研磨液不易过滤,可加少量蒸馏水,并挤压纱布。
使用试剂盒心得:
课本上传统的实验方法采用鸡血,需要过滤很多遍,学生操作太麻烦,且时间明显不够用。而使用香蕉等植物则明显简化实验过程。使用试剂盒之后确实为老师的实验准备节省很多的时间,方便学生操作,减轻了老师的实验任务。而且,试剂盒配制出的试剂实验效果明显,提高实验成功率。
试剂盒或仪器使用改进意见
试剂盒的量少,学生若操作失误则没有充足的试剂使用,可适当增加试剂量以备用。
海南省海口市第一中学 尹翱翔、陈小燕
2013328星期四

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