以图位克隆技术克隆基因,分子标记的开发与筛选是关键步骤之一,差异明显的分子标记在数据统计上一清二楚,不容易出错,如果能够以琼脂糖胶来分辨,更是极大的节约了实验时间。现在随着高通量测序技术的发展,获得一个物种完整基因组变得越来越容易,因此分子标记的开发也不再是什么难事。结合这几年的研究工作,来说一下目前最经常用到的SSR和InDel分子标记的开发与筛选,自己的一些心得体会,以玉米为模式生物基因克隆过程中标记的开发为例。
先说个题外话,很多刚刚接触分子标记的人,常常会问到底什么是分子标记?多态又是什么?举个简单例子,你出门去某个地方,查询得知,要经过一座大桥,一个公园,一个别墅小区,一栋99层的大楼,这些大桥、公园、小区、大楼就是你到目的地前首先要找标志性建筑,在基因克隆上就是所说的分子标记。那么什么是态多呢?所谓多态其实就是差异性。月季花应该都见过,有白色的、有黄色的、有红色的,这些颜色上差异就是多态,只不过这个多态是形态学上的多态。如果说到这里还不是很明白,不用着急,当你亲手做一段时间后,自然就会明白什么是分子标记了。
SSR(Simple Sequence Repeats)简单重复序列,又称之为微卫星DNA,在拟南芥、玉米、水稻、小麦、烟草等植物中非常丰富,因此被广泛用来基因定位、亲缘分析等。其串联重复的核心序列为1—6 bp,重复单位数目不一样,高度多态性就是来源于其串联数目的不同
先说个题外话,很多刚刚接触分子标记的人,常常会问到底什么是分子标记?多态又是什么?举个简单例子,你出门去某个地方,查询得知,要经过一座大桥,一个公园,一个别墅小区,一栋99层的大楼,这些大桥、公园、小区、大楼就是你到目的地前首先要找标志性建筑,在基因克隆上就是所说的分子标记。那么什么是态多呢?所谓多态其实就是差异性。月季花应该都见过,有白色的、有黄色的、有红色的,这些颜色上差异就是多态,只不过这个多态是形态学上的多态。如果说到这里还不是很明白,不用着急,当你亲手做一段时间后,自然就会明白什么是分子标记了。
SSR(Simple Sequence Repeats)简单重复序列,又称之为微卫星DNA,在拟南芥、玉米、水稻、小麦、烟草等植物中非常丰富,因此被广泛用来基因定位、亲缘分析等。其串联重复的核心序列为1—6 bp,重复单位数目不一样,高度多态性就是来源于其串联数目的不同







