微生物显微镜直接计数法

实验七 微生物显微镜直接计数法
一、 目的：
1．了解目镜测微计和镜台测微计的构造。
2．掌握用显微测微计测量微生物细胞大小的方法。
3. 了解血球计数板的构造、原理和使用方法。
二、原理：
在一定条件下，各种微生物细胞的大小，是微生物形态特征之一，也是分类鉴定的依据之一。由于微生物细胞很小，只能在显微镜下测量，一般采用显微测微计来测量。显微测微计有镜台测微计和接目测微计两个部件。
镜台测微计是在中央部分刻有精度等分线的载玻片。一般将1mm等分为100格，每格长度为10mm，用于校正接目测微计。
接目测微计可直接用于测量细胞的大小。它是一块可放在目镜内的圆形玻片，其中央一般有100等分的小格，每小格代表的长度随目镜、物镜放大倍数的大小而改变。通常必须以镜台测微计来校准，从而计算出在一定的接物镜和接目镜的光学系统中，接目测微计每格的实际代表长度，最后方可利用接目测微计直接测量被测对象的长度和宽度。
显微直接计数法，即利用血球计数板在显微镜下直接计数，是一种常用的微生物计数方法，各种单细胞菌体的纯培养悬浮液、菌体较大的酵母菌、霉菌孢子、放线菌和真菌的原生质体等均可采用血球计数板计数。将孢子悬液（或菌悬液）放在血球计数板载玻片与盖玻片之间的计数室内，由于载玻片上的计数室盖上盖玻片后的容积（0.1mm³）是一定的，所以可以根据在显微镜下观察到的微生物数目换算为单位体积内的微生物数目。
样品中菌（或孢子）数（个