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HLA 基因分型在亲子鉴定中的应用 l 例分析

2012-02-22 22:09阅读:
HLA 基因分型在亲子鉴定中的应用 l 例分析
李晓丰 辽宁省血液中心法医物证所,湖南白求恩亲子鉴定网(www.dnajianding.net
笔者在 1 例二联体亲子鉴定案件中,应用常规的短串联重复序列( short tandem repeat , STR )方法无法确定亲子关系,但在加做了人类白细胞抗原( human leukocyte antigen , HLA )基因分型后可以得出排除的确切结论,现报告如下。
1 病历摘要本司法鉴定所承办的二联体亲子鉴定案件 1 例,被检测父和被检测子 EDTA 一 Na :抗凝静脉血各 2 ml ,进行 DNA 提取 STR 位点检测和 H LA 基因分型。 DNA 提取:采用北京天为时代公司血液基因组 DNA 提取试剂盒(批号: H6808 ) ,将 DNA 浓度调在 0 . 05 一 a 125 ng /川范围。 sTR 位点检测:采用美国 ABI 公司的 AmpFI STR IdentifilerTM 试剂盒(批号: 080904 )进行 ST R16 位点基因座的检测。 PCR 扩增产物使用 ABI PrismT ' 310 仆 Avant Geneti 。 Analyze ,基因测序仪进行毛细管电泳, ABI 310 仆 Avant DataC 。 llection Software 1 . 0 收集电泳信息, Genescan 3 . 7 软件确定样本的 DNA 片段长度, Gelr。 type 3 . 7 软件将样本等位基因片段与标准 ladder 进行比对,确定样本的基因型。 HLA 基因分型:采用聚合酶链式反应-序列特异性寡核普酸探针( PcR - ssoP )方法,应用美国 LAB - TypeTM ( on 。 Lambda , Inc . Los Angeles , CA , USA )试剂盒(批号: A 位点 010 , B 位点 012 , DRBI 位点: 013 ) ,进行 HLA - A 、 B 、 DRBI 位点基因分型。将 DNA 进行 PCR 扩增,产物杂交后,用 Luminex 流式磁珠反向杂交仪检测,结果应用 HLA T00ls 软件判读。亲权指数和亲权概率计算参见
文献[ 1 ]。根据 16 个 STR 位点的检测结果,被检测父在巧个位点的基因型符合作为被检测子亲生父亲的遗传基因条件,而被检测父在 D135317 位点的基因型不符合作为被检测子亲生父亲的遗传基因条件,见表 1 。去除 D135317 位点计算父权概率大于 99 . 9 %。根据 H LA 一 A 、 B 、 DRBI 位点的基因分型结果,被检测父在 3 个 HLA 位点的基因型均不符合作为被检测子亲生父亲的遗传基因条件,见表 2 。
2 讨论
目前在亲子鉴定和个体识别中最常用的遗传标记是 STR 。本例在进行了 ST R16 位点基因座检测后,显示被检测父只在 D135317 一个位点不符合作为被检测子亲生父亲的遗传基因条件,由于 sTR 位于人类基因组高变区,存在较高突变率[ 2 ] , 只有在 3 个及以上 STR 位点违反遗传规律时,才可作出排除亲子关系的结论[ 3 ]。因此本例鉴定不能得出肯定或排除父权的结论。在加做了 HLA 基因分型之后,被检父在 HLA 一 A 、 B 、 DRBI 三个位点均不符合作为被检测子亲生父亲的遗传基因条件,据此可以排除二人具有生物学亲子关系。
本例鉴定在去除 D135317 位点计算父权概率时,得到父权概率大于 99 . 9 %。因此不能根据父权概率判断是否为 STR 突变。 3 个以下位点不符合遗传定律时,必须增加遗传标记进行鉴定。
HLA 是人类最具多态性的遗传标记。如今 HLA 基因分型代替了非父排除率较低的 HLA 血清学分型,而且由于 PCR - SSOP 探针设计的改进和优化,应用基于 Luminex 平台的反向微珠杂交法可以进行 HLA 一 A 、 B 、 DRBI 的中、高分辨分型,使 HLA 的非父排除率显著提高。此外应用 SBT 可以直接进行 HLA 等位基因检测,进一步提高了 HLA 的非父排除率。因此, HLA 是目前亲子鉴定非父排除率最高的遗传标记系统。但是由于价格的原因,目前 HLA 在亲子鉴定中的应用受到一定限制。但在有争议的亲子鉴定中, HLA 应该是最好的遗传标记。本例亲子鉴定经 16 位点 STR 分型后不能得出肯定或排除父权的结论,加做 HLA 基因分型后, HLA 一 A 、 B 、 DRBI 位点的基因分型结果均可以排除父权。 HLA 基因分型在本例亲子鉴定的应用,充分证明了 HLA 在亲子鉴定中起到的重要作用。 HLA <wbr>基因分型在亲子鉴定中的应用 <wbr>l <wbr>例分析
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