汉口上海路天主教堂位于湖北省武汉市汉口区上海路16号，为天主教汉口教区主教座堂。
武汉自古便有“九省通衢”之誉，是中国重要的通商口岸之一。1861年，汉口正式开埠，武汉的教堂也随之建立。1866年，意大利传教士明位笃主教从英租界工部局购地皮6044平方米，委托另一意大利教士余作宾修建教堂,系罗马巴西利卡式建筑风格。
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教堂平面布局为拉丁十字形，两层砖木结构，整体长40米，宽为26米，堂内三拱廊的中间正厅宽14米。后侧左右各有圆形塔式钟楼1座，堂顶十字架处高22米。建筑面积1024平方米，内设祭台5座，可同时容纳1000多人做弥撒。因本堂奉耶稣的义父若瑟为主保，所以它在教内被称为圣若瑟堂。堂区前院为教堂和主教公署，后院为武汉修女院。
上海路天主教堂也称为汉口圣若瑟堂，教堂于1874年动工，1876年落成，耗资12万法朗。20世纪初，天主教鄂东教区活动中心由武昌移至汉口。1923年划分教区时，该堂成为汉口主教座堂。1944年12月10日，美军轰炸武汉时，教堂和主教府被炸毁一部分，1948年修复。1956年再次维修。1980年4月重新开堂。现为武汉市天主教会教务活动中心。
汉口上海路天主堂是湖北省文物保护单位、武汉市优秀历史建筑，至今保存完好。它不仅是一座在历史中屹立至今的老建筑，它还承载着一种文化的记忆，它还是这座城市沧桑历史的见证，在它的身上体现着“大武汉”历史和“大武汉”的气度。
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