磁珠法全血DNA提取的经典问题汇总

文章来源：洛阳吉恩特生物科技有限公司
随着磁珠法核酸提取技术的不断普及，越来越多的实验室会进行磁珠法DNA提取，在使用的初期阶段，也会遇到各种各样的问题，近期就有许多老师和我们讨论如何利用磁珠进行全血基因组DNA的提取，我们对其中的常见问题进行了总结，供大家参考。
1、全血上样量与裂解体系
全血上样量是磁珠法全血DNA提取的经典问题，无论用什么方法，首先要解决的就是上样量问题，不同的上样量对应不同的试剂体系，上样量过多或多少都会影响裂解的效果。以GNT-B02的磁珠法全血基因组DNA提取试剂盒为例，标准上样量为200ul，上下浮动不超过100ul，搭配的裂解液用量为300-400ul，有些老师由于实验要求，需要大体积的上样量，这在实际操作中，就需要对磁珠法全血DNA提取的操作流程进行改良，一般的改良思路是按比例放大裂解体系；但有些实验的上样量达到毫升以上，这种情况下，就不能再简单的放大裂解体系了，需要先用红细胞裂解液对样品进行处理，将上样体积浓缩后，再进行磁珠法全血DNA提取的操作流程优化。
2、磁珠结团
磁珠结团是在磁珠法全血DNA提取过程中经常遇到的现象，是由磁珠本身特性和磁珠所处试剂环境两方面造成的，有些磁珠不仅在全血DNA提取过程中会结团，在其他的样本提取中也同样会结团，有些老师在初次遇到这种现象的时候会感觉不适应，其实结团现象可以用来提前预判实验结果，结团往往是吸附了大量核酸，如果哪次实验没有结团，本次的实验结果或许会不太好，不过也不能一概而论，杂质太多也是引起磁珠结团的原因。
通过修改试剂配方，优化试剂配置，可以改善磁珠法全血DNA提取过程中的结团现象，但是该工作较为复杂，需要对各种参数进行调整。不过对于磁吸速度较慢的磁珠，结团后能明显提高磁吸速度，提高实验效率，只要磁珠在洗脱步骤能够分散，而且结果也在标准范围内，磁珠结团并不会影响整体效果。
3、得率低