[转载]Loading Buffer的成分

TRIS稳定pH,DTT破坏二硫键,SDS使蛋白带电,甘油在加热时防止一定程度的积聚

Loading Buffer)5X,是一种经过改良的以溴酚蓝为染料,5倍浓缩的蛋白上样 缓冲液。 可以用于常规的SDS-PAGE蛋白样品上样。

loading buffer中含有甘油，起到沉降DNA（即PCR产物）的作用，色素溴酚蓝（Bromophenol Blue)、二甲苯腈蓝FF（Xylene Cyanol FF)，可以观察电泳的进行情况。溴酚蓝在琼脂糖凝胶（0.5% ~ 1.4%）中约与300 bp的双链线状DNA的迁移速度相同（在0.5×TBE中)，而二甲苯腈蓝FF则与4 kbp的双链线状DNA的迁移速度相等。
如果只是用于电泳得话，可以5或8ulPCR产物加1ul的loading buffer上样，其实加入多少关系不大的。