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DB3.1感受态细胞

2017-04-21 08:45阅读：

http://blog.sina.cn/dpool/blog/u/1816654081

DB3.1感受态细胞
产品编号
 产品名称
 包装
MCC1510
 DB3.1感受态细胞
 100μl*10

1.产品简介：
本产品是采用大肠杆菌DB3.1菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，适用于构建或扩繁含有ccdB基因的质粒载体。
基因型：F- gyrA462 endA1 glnV44 (sr1-recA)mcrBmrrhsdS20(rB-,mB-)ara14galK2lacY1proA2rpsL20(Smr)xyl5 Δleu mtl1
特点：1. DB3.1菌株含有 gyrA462
pan >基因，有对ccdB 毒性基因的抗性，特别适用于构建或扩繁含有ccdB 基因的质粒载体。具链霉素抗性。pUC19检测，转化效率可达108 cfu/μl DNA。
2.包装清单：
产品编号
 产品名称
 规格
MCC1510
 DB3.1感受态细胞
 100μl*10
—
 说明书
 1份

3.保存条件：-80℃。
4.使用说明：
1． 取100 μl感受态细胞置于冰浴中融化。
2．待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA（根据实际情况加入适量的DNA，通常100 μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和），用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30min。
3． 42℃热击45sec，然后快速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3min，该过程不要摇动离心管。
4．每个离心管中加入450 μl无菌的SOC或LB培养基（不含抗生素），混匀后置于37℃摇床， 150 rpm振荡培养45～60min使菌体复苏。
5． 根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养， 37℃培养12~16h。
5.注意事项：
1. 刚化冻的细胞转化效率最高，避免反复化冻。
2. 整个动作要轻柔。
*本试剂仅供实验室研究使用

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