科技论文---硅酸盐细菌的培养及鉴定
2011-02-13 19:14阅读：
硅酸盐细菌的培养及鉴定
（制作人：王珏
指导老师：韩磊）
内容提要：
利用含钾、缺氮的培养基选择性培养，从而证实硅酸盐细菌菌有解钾和固氮的作用并可直接观察到该菌的菌落形态。
关键词
硅酸盐细菌（胶质芽孢杆菌）；手提式高压蒸汽灭菌锅；无菌操作台；
1材料与方法
1.1实验材料
试管（
80X180）10只；培养皿12个；试管架；酒精灯；打火机；烧杯；量筒（200mlml）移液管（1ml10ml）吸耳球；玻璃棒；电子天平；药匙；称量纸；电炉；手提式高压蒸汽灭菌锅；恒温箱；PH试纸；棉花；牛皮纸；报纸；空盒子；麻绳；接种针2个；涂布棒2个；纱布；三角瓶（250ml）4个；玻璃珠；铁架台；橡胶管；漏斗；弹簧夹；剪刀；记号笔；研钵；铁锨；铁锤；秒表；酒精；无菌操作台等
1.2实验步骤
1.2.1准备
将实验所需的玻璃器皿洗涤﹑烘干后包扎，以备灭菌；
把实验所需的纱布和接种针包扎以备灭菌；
生理盐水的配制：分别配制225ml和100ml的生理盐水（已知其浓度为0.85%-0.9%）并分别用两个250ml的三角瓶装之。
把少许玻璃珠装入含225ml生理盐水的三角瓶中，盖上棉塞以备灭菌。
钾长石粉的制备：取肉褐色或褐色的钾长石，将之砸碎后放到研钵中研碎研细。收集到烧杯中用20%的盐酸溶液淋洗即酸洗；再用自来水充分冲洗至中性。晾干备用。
取样；从田间选长势较好的植株，用铁锨将其四周铲松，轻轻将植物连根拔起，抖落下植物根部带的土壤用牛皮纸包好带回实验室。置于4℃的冰箱内，以制作菌悬液。
1.2.2选择培养基的制作
表一硅酸盐细菌分离及保存培养基
成分
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质量
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蔗糖
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0.75g
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磷酸氢二钠
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0.3 g
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MgSO4·7H2O
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0.075
g
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三氯化铁
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0.00075
g
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碳酸钙
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0.015
g
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钾长石粉
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0.075 g -0.15
g
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琼脂粉
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1.5g-1.65g
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蒸馏水
|
150ml
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PH
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7.0-7.5
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表二无氮培养基（阿须贝（Ashby）培养基）（分离用）
成分
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质量
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甘露醇
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1.5g
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磷酸氢二钾
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0.03
g
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MgSO4·7H2O
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0.075
g
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氯化钠
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0.03
g
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碳酸钙
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0.015
g
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GaSO4·7H2O
|
0.015
g
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琼脂粉
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2.7g-3g
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蒸馏水
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150ml
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PH
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7.0-7.5
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除了琼脂粉和碳酸钙之外，其余药品称量后溶于盛有2∕3体积蒸馏水的烧杯中；水浴加热后加入碳酸钙，煮沸2到3分钟后再放入琼脂粉；待琼脂粉完全溶解再定容到150ml
