IHC之HRP-DAB显色检测
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【显色检测】
为了方便显色检测，一抗、二抗或链霉亲和素可与酶结合。在加入可溶的有机底物时，酶与底物反应，产生不溶的有色产物，沉积在抗原表达的位置。常用的酶包括辣根过氧化酶（HRP）和碱性磷酸酶，它们分别将3,3’二氨基联苯胺（DAB）和3-氨基-9-乙基咔唑（AEC）转化成棕色和红色的终产物。DAB比AEC更常用，因为后者易溶于酒精，且暴露在过度光照下时更容易褪色。在使用AEC时必须用水性的复染剂和封片剂。
通常认为显色检测比免疫荧光更为灵敏，但没有那么方便，因为孵育和封闭步骤更多。与免疫荧光相似，显色检测也允许多个抗原的观察，但这些抗原只能在细胞和组织的不同位置，因为重叠的颜色可能会使结果难以解释。DAB显色检测的好处在于，HRP和DAB发生反应生成的有色沉淀物对光不敏感，玻片可保存数年。与需要专门光源和滤光片组合的荧光显微镜不同，显色技术只需要一般的光学显微镜。
—用HRP-DAB显色法检测组织切片
以下实验方案由R&D Systems IHC/ICC实验室设计并优化，使用HRP-DAB细胞和组织染色试剂盒。该方案须依据具体使用的组织
