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实验室细胞学染色4——美兰染液染色法

2012-11-13 18:39阅读:
美兰又叫亚甲基蓝。
染色原理:细菌经过进行有氧呼吸产生大量的二氧化碳,使添加亚甲基蓝的培养液变弱酸性,亚甲基蓝由氧化态的蓝色变成还原态的无色,所以可以检测细菌的数目多少。细菌越多,变无色的区域越多
美兰染液的配制:100ml双蒸水(将经过一次蒸馏后的水,再次蒸馏所得到的水)中加入1g美兰粉剂,制成1%的美兰染液。
美兰作为单染色,一般要经过涂片、固定、染色、水洗和干燥五个步骤。
1涂片临床标本或液体培养物可直接涂抹于洁净的载玻片上,固体培养的细菌先在玻璃片上滴一滴生理盐水,然后取菌少许在盐水中磨匀,呈轻度混浊。涂好的菌膜大小一般以
1cm2左右为宜。
(2)干燥涂片最好在室温下自然干燥,或将标本面向上,置于酒精灯火焰高处慢慢烘干,切不可在火焰上烧干。
(3)固定细菌的固定常用火焰加热法,即将上述已干的涂片在火焰中迅速通过35次,温度以手能摸时热而不烫为度。目的在于杀死细菌,凝固细胞质,改变细菌对染料的通透性。
4已做好的涂片上滴加美兰染液,染色1min
5以水冲洗至无颜色流下为止,
6自然干燥或以远火烘干后镜检。

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