[转载]甘油保存菌种的方法
2017-11-03 13:27阅读:
1.
20%
甘油保存菌种是指甘油:菌液=20:80,800ul菌液加200u灭菌l甘油后的甘油后,充分混匀后,-70度保藏.(注意甘油要慢慢吸)
2.
将一般细菌的菌种纯化后接种于普通肉汤管,4~6h增菌后,加入适量甘油一生理盐水保存液,-20℃冰箱保存;链球菌属和奈瑟氏菌属的菌株纯化后接种于血清肉汤管,在5%~10%CO2中经8~10h增菌后,加入适量保存液,80℃低温冰箱保存;真菌菌种纯化后直接取菌洗入肉汤,不做培养,加入保存液后,-20℃冰箱保存。结果在连续3年实验期内,各菌种保存效果良好,且其形态结构、染色特性、生化反应等与标准株相符。结论使用甘油生理盐水保存法来保存菌种,各菌种保存时间长,方法简便,特别是使链球菌、奈瑟氏菌和弧菌等需特殊保存方法保存的菌株在一般实验室得以保存。
3.
常用的是终浓度 10-30% 的甘油。
由于纯甘油十分粘稠,很难定量,一般配成终浓度 50%
的水溶液,高压灭菌后室温保存即可。使用时按 50% 甘油:菌液 = 1:1 混合均匀,然后迅速冻结。
A.
先把甘油稀释成50%,然后灭菌
这样20%的终浓度用400微的菌体加600微的50%甘油混合不就可以啦
纯的甘油太粘稠啦,用枪不好吸的
B 终浓度15%。甘油配成80%的浓度,到时候加800微升菌体,200微升甘油就好。】
4. 请问:甘油灭菌问题
请问各位:每次细菌保种使用甘油前(即使以前高压过)都必须要高压吗?谢谢!
以前是多久了,保险起见还是多灭一次哈,灭完后有水汽,可以放在烘箱里烘干水汽再用
把甘油灭菌后趁热分装在EP管中,然后-20 ℃保存,这样每次保存菌种的时候用几个拿几个,方便的很,又不会污染。
我建议先把甘油配成百分之五十的浓度,然后高压,4度保存,随用随取,很方便,保存菌种时菌种和甘油按1:1的比例加入,甘油的终浓度是百分之二十五,不过要在超净台中操作。
楼上的错了,甘油的保菌浓度一般在10%~15%之间。
没%有错,可以保存,甘油的保菌浓度一般在10%~30%之间,我们经常用25%的浓度来保存细菌,这样很方便啊
医院液体加温箱