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中染料被还原,成为无色状态.
将0.5g健那绿溶解于50mL生理盐水中,加温到30-40摄氏度,使其充分溶解.
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配制方法
配制质量分数为1%健那绿染液:将0.5g健那绿溶解于50mL生理盐水中,加温到30-40摄氏度,使其充分溶解.
主要用途
健那绿是专一性线粒体的活细胞染料，可使线粒体呈现蓝绿色，而细胞质接近无色，以在高倍显微镜下观察线粒体分布和形态制备方法
以4-氨基-N, N-二乙基苯胺或对苯二胺（含N, N-二乙基苯胺）为起始原料，在氧化剂存在的条件下，与苯胺环合，得到亚甲基紫3RAX，随后，经过重氮化和偶合反应制备健那绿B。 [1]
台盼蓝 - 基本性质
- 中英文名称：台盼蓝（Trypan Blue)或称台盼兰、锥虫蓝、曲利苯蓝
分子式：C34H24N6O14S4Na4
分子量: 960.82
可溶于水（10mg/ml)
是细胞活性染料，常用于检测细胞膜的完整性。还常用于检测细胞是否存活。活细胞不会被染成蓝色，而死细胞会被染成淡蓝色。
台盼蓝可被巨噬细胞吞噬，故可用于巨噬细胞的活体染色剂。
机理
正常的活细胞，胞膜结构完整，能够排斥台盼蓝，使之不能够进入胞内；而丧失活性或细胞膜不完整的细胞，胞膜的通透性增加，可被台盼蓝染成蓝色。通常认为细胞膜完整性丧失，即可认为细胞已经死亡，这与中性红作用相反。因此，借助台盼蓝染色可以非常简便、快速地区分活细胞和死细胞。台盼蓝是组织和细胞培养中最常用的死细胞鉴定染色方法之一。注意凋亡小体也有台盼蓝拒染现象。
台盼蓝染色后，通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数，就可以对细胞存活率进行比较精确的定量。
台盼蓝染色只需3-5分钟即可完成，并且操作非常简单。
步骤
步骤：(来自supergama)
1、4%台盼蓝母液：称取4g台盼蓝，加少量蒸馏水研磨，加双蒸水至100ml，用滤纸过滤，4度保存。使用时。用PBS稀释至0.4%。（也可买Gibco的成品）; T$ d& \! h% l, E) Z) A- W
2、胰酶消化贴壁细胞，制备单细胞悬液，并作适当稀释。
3、染色：细胞悬液与0.4%台盼蓝溶液以9:1混合混匀。（终浓度0.04%）
4、计数：在三分钟内，分别计数活细胞和死细胞。 1 e7 e* I* S) ^% X8 U$ K- _
5、镜下观察，死细胞被染成明显的蓝色，而活细胞拒染呈无色透明状。
6、统计细胞活力：活细胞率（%）= 活细胞总数/（活细胞总数+死细胞总数）×100%
其他
保存条件
室温保存
说明
有潜在致癌危险
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。