稳转细胞系  原理

稳转细胞系原理
通过脂质体介导转染法及电穿孔等基因转染技术，将靶基因被导入细胞后，一般在转染后48小时，靶基因即在细胞内表达。如若建立稳定的细胞系，则可对靶细胞进行筛选，根据不同基因载体中所含有的抗性标志选用相应的药物，最常用的直核表达基因载体的标志物有潮霉素（hygromycin）和新霉素（neomycin）。筛选后可以得到稳定表达外源基因的细胞克隆，这就是稳定转染。稳定转染的质粒DNA整合到染色体上，使得转染的细胞可长期表达。哺乳动物细胞表达系统的优势在于能够指导蛋白质的正确折叠，提供多种翻译后加工功能，因而表达产物在分子结构、理化特性和生物学功能方面最接近于天然的高等生物蛋白质分子。