载体与目的基因的酶切与连接

载体与目的基因的酶切与连接
1.末端结构
对载体进行酶切处理，要注意酶切片段的末端结构以及黏性末端的碱基组成，载体与插入DNA的连接方式有如下几种：
（1）用同一种限制酶切割载体和插入DNA，二者能正确连接，但不能确定方向(见图1）；
（2） 用不同限制酶切割（同尾酶），所得单链突起能互补，二者能正确连接，但不能确定方向（见图1）；

（3） 用不同或相同的限制酶切割载体和插入DNA形成平末端，能连接但连接效率低，而且不能确定方向（见图2）；
（4） 用不同的限制