常用磷酸缓冲液的配制方法
2013-02-16 08:53阅读：
一、磷酸钠缓冲液（phosphate buffer，PB）
试剂： NaH2PO4·2H2O
Na2HPO4·12H2O
配制方法：
配制时，常先配制0.2mol/L的
NaH2PO4和0.2mol/L的Na2HPO4，两者按一定比例混合即成0.2mol/L的磷酸盐缓冲液（PB），根据需要可配制不同浓度的PB和PBS。
（1）0.2mol/L的
NaH2PO4：称取NaH2PO4.2H2O
31.21g(或
NaH2PO4·H2O
27.6g)加重蒸水至1000ml溶解。
（2）0.2mol/L的
Na2HPO4：称取NaHPO4·12H2O
71.64g（或
Na2HPO4·7H2O
53.6g或
Na2HPO4·2H2O
35.61g）加重蒸水至1000ml溶解。
（3）0.2mol/L pH7.4的PB的配制：取19ml 0.2mol/L的
NaH2PO4和81 ml 0.2mol/L的 Na
2HPO4，充分混合即为0.2mol/L的PB（pH约为7.4～7.5）。若pH偏高或偏低，可通过改变二者的比例来加以调整，室温保存即可。
25℃下0.2mol/L磷酸钠缓冲液的配制
pH值 0.2mol/LNa2HPO4(ml)
0.2mol/LNaH2PO4(ml)
5.8 8.0 92.0
5.9 10.0 90.0
6.0 12.3 87.7
6.1 15.0 85.0
6.2 18.5 81.5
6.3 22.5 77.5
6.4 26.5 73.5
6.5 31.5 68.5
6.6 37.5 62.5
6.7 43.5 56.5
6.8 49.0 51.0
6.9 55.0 45.0
7.0 61.0 39.0
7.1 67.0 33.0
7.2 72.0 28.0
7.3 77.0 23.0
7.4 81.0 19.0
7.5 84.0 16.0
7.6 87.0 13.0
7.7 89.5 10.5
7.8 91.5 8.5
7.9 93.5 6.50
8.0 94.7 5.3
Na2HPO4·2H2O分子量 = 178.05，0.2
mol/L溶液为35.61克/升。
Na2HPO4·12H2O分子量 = 358.22，0.2
mol/L溶液为71.64克/升。
NaH2PO4·H2O分子量 = 138.01，0.2
mol/L溶液为27.60克/升。
NaH2PO4·2H2O分子量 = 156.03，0.2
mol/L溶液为31.21克/升。
25℃下0.1mol/l磷酸钾缓冲液的配制
pH值 1mol/LK2HPO4(ml)
1mol/LKH2PO4(ml)
5.8 8.5 91.5
6.0 13.2 86.8
6.2 19.2 80.8
6.4 27.8 72.2
6.6 38.1 61.9
6.8 49.7 50.3
7.0 61.5 38.5
7.2 71.7 28.3
7.4 80.2 19.8
7.6 86.6 13.4
7.8 90.8 9.2
8.0 94.0 6.0
