transwell小室膜上细胞染色后如何封片?transwell实验技术

Transwell是一种实验技术，这项技术的主要材料是Transwell小室（Transwell chamber，Transwell insert），其外形为一个可放置在孔板里的小杯子，杯子底层的一张有通透性的膜，而杯子其余部分的材料与普通的孔板是一样。这层膜带有微孔，孔径大小有0.1－12.0µm，根据不同需要可用不同材料，一般常用的是聚碳酸酯膜（polycarbonate membrane）。
transwell小室膜上细胞染色后如何封片吗？另外matrigel买回后要分装吗？作侵袭实验coster的24孔的transwell上室应加多少体积matrigel?
做法：
1 封片： 将膜用小剪刀从内面边沿裁掉，放到载玻片上，注意细胞面朝上，然后滴一滴树胶，盖玻片封片。
2 分装一下好些，用不完的部分不要稀释。
3 加多少体积偶没有注意，要将PVPF膜充分遮盖，加入的液体不能流到pvpf膜上，也就是不能漏，否则会影响实验结果。
细胞迁移与侵袭实验常用8.0、12.0µm膜，上室种肿瘤细胞，下室加入FBS或某些特定的趋化因子，肿瘤细胞会向营养成分高的下室跑，计数进入下室的细胞量可反映肿瘤细胞的迁移能力。但细胞侵袭实验与迁移实验不同的是，聚碳酸酯膜上室侧铺上一层基质胶，用以模仿体内细胞外基质，细胞欲进入下室，先要分泌基质金属蛋白酶（MMPs）将基质胶降解，方可通过聚碳酸酯膜。