HeLa 细胞的复苏、培养与传代
严格按照无菌操作复苏、培养和传代HeLa细胞。
1) 打开超净台，把实验中所需用具放到超净台上。
2) 从冰箱中取出0.25%胰酶、D-Hanks、培养基。可以把胰酶和D-Hanks的瓶盖打开或者拧松。
3) 取待传代的细胞，用尖吸管弃去旧的培养基，加入D-Hanks。轻轻摇动后将Hanks弃掉。
4) 用尖吸管吸取适量胰酶加入，加入的量以覆盖整个细胞培养面为宜，轻轻摇动; 2--5 min 后迅速将消化液吸出。消化时间长短是实验成败的关键，宁可短消化，不能过消化，否则细胞会变死。在倒置显微镜下观察，当细胞质回缩，胞间间隙加大为消化适宜。
5) 取培养基加入细胞，反复轻轻吹打培养皿壁，制备细胞悬液。吹打的部位均匀，从上到下，从左到右，顺序进行吹打，保证各个部位的培养细胞均能吹打到，成片的细胞已经分散成小的细胞团或者单细胞便停止吹打。吹打时用力不要过猛，尽量不要出现气泡，以免损伤细胞。
6)
严格按照无菌操作复苏、培养和传代HeLa细胞。
1) 打开超净台，把实验中所需用具放到超净台上。
2) 从冰箱中取出0.25%胰酶、D-Hanks、培养基。可以把胰酶和D-Hanks的瓶盖打开或者拧松。
3) 取待传代的细胞，用尖吸管弃去旧的培养基，加入D-Hanks。轻轻摇动后将Hanks弃掉。
4) 用尖吸管吸取适量胰酶加入，加入的量以覆盖整个细胞培养面为宜，轻轻摇动; 2--5 min 后迅速将消化液吸出。消化时间长短是实验成败的关键，宁可短消化，不能过消化，否则细胞会变死。在倒置显微镜下观察，当细胞质回缩，胞间间隙加大为消化适宜。
5) 取培养基加入细胞，反复轻轻吹打培养皿壁，制备细胞悬液。吹打的部位均匀，从上到下，从左到右，顺序进行吹打，保证各个部位的培养细胞均能吹打到，成片的细胞已经分散成小的细胞团或者单细胞便停止吹打。吹打时用力不要过猛，尽量不要出现气泡，以免损伤细胞。
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