导语
转化效率定义为转化 1 μg 质粒至给定体积的感受态细胞中所能产生的菌落形成单元(cfu)的数量。但是，转化 1 μg 质粒是不常见的。实际上，转化效率常以在最适条件下转化 100 pg-1 ng 高纯度超螺旋质粒来计算。计算转化效率(TE)的公式为：TE = 菌落数/μg/稀 得最佳实验结果。那么本文介绍能够提高质粒转化效率的方法和技巧。
提高质粒转化效率的方法
高效转化方法
1. 冰上解冻细胞 10 分钟
2. 细胞中加入 1 pg-100 ng 的质粒 DNA(1-5 μl)，混匀，切忌蜗旋
3. 置于冰上 30 分钟
4. 42 热激 10-30 秒或根据推荐条件进行热激
5. 置于冰上 5 分钟
6. 加入 950 μl 室温的 SOC
7. 37 振荡(250 rpm)培养 60 分钟
8. 混匀细胞，切忌蜗旋，并用 SOC 做系列 10 倍稀释
9. 每个稀释比例取 50-100 μl 稀释液涂布于预热的选择平板上，37(SHufflee® 菌株 30)过夜培养或按推荐条件培养
5 分钟转化方法
( 与上述方法相比只有 10% 的转化效率 )
1. 手握解冻细胞
2. 细胞中加入 1 pg-100 ng 的质粒 DNA (1-5 μl)，混匀，切忌蜗旋
3. 置于冰上 2 分钟
4. 42 热激 30 秒或按推荐条件进行热激
5. 置于冰上 2 分钟
6. 加入 950
转化效率定义为转化 1 μg 质粒至给定体积的感受态细胞中所能产生的菌落形成单元(cfu)的数量。但是，转化 1 μg 质粒是不常见的。实际上，转化效率常以在最适条件下转化 100 pg-1 ng 高纯度超螺旋质粒来计算。计算转化效率(TE)的公式为：TE = 菌落数/μg/稀 得最佳实验结果。那么本文介绍能够提高质粒转化效率的方法和技巧。
提高质粒转化效率的方法
高效转化方法
1. 冰上解冻细胞 10 分钟
2. 细胞中加入 1 pg-100 ng 的质粒 DNA(1-5 μl)，混匀，切忌蜗旋
3. 置于冰上 30 分钟
4. 42 热激 10-30 秒或根据推荐条件进行热激
5. 置于冰上 5 分钟
6. 加入 950 μl 室温的 SOC
7. 37 振荡(250 rpm)培养 60 分钟
8. 混匀细胞，切忌蜗旋，并用 SOC 做系列 10 倍稀释
9. 每个稀释比例取 50-100 μl 稀释液涂布于预热的选择平板上，37(SHufflee® 菌株 30)过夜培养或按推荐条件培养
5 分钟转化方法
( 与上述方法相比只有 10% 的转化效率 )
1. 手握解冻细胞
2. 细胞中加入 1 pg-100 ng 的质粒 DNA (1-5 μl)，混匀，切忌蜗旋
3. 置于冰上 2 分钟
4. 42 热激 30 秒或按推荐条件进行热激
5. 置于冰上 2 分钟
6. 加入 950