JC-1染色试剂盒使用指南

　　MCE产品 JC-1线粒体膜电位检测试剂盒资料

　　规格：1T, 1 mL （100 万细胞）

　　用途：早期细胞凋亡

　　检测设备：荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、荧光分光光度计或流式细胞仪

　　通道：FITC 通道看绿色，PI 通道看红色

　　指示：红绿荧光比例变化

　　 Phosphate-buffered saline （PBS） （1× ） 的配制

　　a.将 PBS （10×） 温浴，直至完全融化。

　　b.按 1:10 的比例，用 dH2O 稀释 PBS （10×） 至 PBS （1×）。

　　 细胞染色

　　1） 悬浮细胞：

　　a.以 6 孔板为例，每孔用 1 mL 培养基重悬 100 万细胞，其他培养器皿以此类推。

　　b.阳性对照的设置：取适量 CCCP （50 mM） 恢复至室温，阳性对照孔培养基中加入 1 μL，其终浓度为 50 μM，细胞培养箱 37孵育 5 分钟。

　　c.取适量 JC-1 （200 μM） 恢复至室温，每孔培养基中加入 10 μL JC-1 （200 μM），其终浓度为 2 μM，细胞培养箱 37孵育 15-20 分钟。

　　d.37 孵育结束后，400 g 4离心 3-4 分钟，沉淀细胞。弃上清，注意尽量不要吸除细胞。

　　e.用 PBS （1×） 洗涤 2 次：加入 2 mL PBS （1×）