C18胶柱分离法

1.原理
　　 C18胶柱（Sep-PaK C18 Cartridge)可根据样品溶质极性不同，分离水溶液中或极性较大的水和有机溶剂的混合物。当甲醇或丙酮等有机溶剂的提取液通过C18柱时，能有效地去除脂溶性色素，C18柱分离法常常用于酶联免疫吸附（ELISA）检测植物激素的样品前处理。

2.仪器设备
(1)C18胶柱分离装置；
(2)2 mL离心管：2支。
3.试剂
(1)80%甲醇；(2)纯甲醇；(3)乙醚
4.方法步骤
4.1.样品提取：准确称取植物鲜样1.0000 g.精确至0.100 mg,分三次加入预冷的80%甲醇 3?4 mL,在冰浴中研磨提取3次（在弱光下进行），合并提取液并定容到5 mL,在4 下 5000 g离心10 min.上清液在一40黑暗中可保存一月。暂时不进行分析的样品，可以在称取 鲜重后，加入3 mL80%甲醇，密封保存在一20冰箱中。
4.2.分离与纯化：C18胶柱分离纯化装置如上图所示，