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血琼脂基础培养基的主要成分和用途及注意事项有哪些?

2026-01-21 15:28阅读:
血琼脂基础培养基的主要成分和用途及注意事项有哪些?



血琼脂基础培养基是临床微生物检验和微生物学研究中最常用的培养基之一,属于营养丰富的鉴别培养基,主要用于细菌的分离、培养、鉴定及溶血特性观察。其核心特点是在基础营养琼脂中添加动物血液(通常为羊血、兔血或马血),既提供丰富营养,又能通过溶血反应鉴别细菌特性。

一、主要成分及作用

血琼脂基础培养基由基础营养成分和血液成分两部分组成,各成分作用如下:

1、基础营养成分(构成培养基骨架)

血琼脂基础培养基的主要成分和用途及注意事项有哪些?

2、血液成分(关键功能成分)
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通常添加5%~10% 的脱纤维羊血(也可用兔血、马血,根据检测需求选择),其作用包括:

营养补充:提供血红蛋白、血红素(X 因子)、辅酶 A(V 因子)等特殊营养物质,满足苛养菌(如链球菌、脑膜炎奈瑟菌、百日咳杆菌)的生长需求;

溶血鉴别:通过红细胞是否被细菌产生的溶血素破坏,观察溶血现象,用于细菌的鉴别;

某些细菌的生长辅助:如嗜血杆菌属细菌需要血液中的 X 因子(血红素)和 V 因子(烟酰胺腺嘌呤二核苷酸)才能生长。

二、主要用途

血琼脂基础培养基凭借其营养丰富性和鉴别功能,广泛应用于微生物检验的多个场景:

1、细菌分离与纯培养

适用于各种临床标本(如血液、痰液、脓液、脑脊液、尿液等)中细菌的分离,尤其是营养要求较高的细菌(如链球菌、肺炎球菌、脑膜炎球菌);

通过划线接种可获得单菌落,用于细菌的纯培养和后续鉴定。

2、细菌溶血特性鉴别(核心用途)

通过观察菌落周围红细胞的破坏情况,将细菌分为三类溶血类型,是细菌鉴定的重要依据:

β- 溶血(完全溶血):细菌产生的溶血素可完全破坏红细胞,菌落周围形成透明无色的溶血环(如金黄色葡萄球菌、A 群链球菌);

α- 溶血(不完全溶血):细菌产生的酶使红细胞部分破坏,血红蛋白转化为绿色的正铁血红蛋白,形成草绿色溶血环(如肺炎链球菌、草绿色链球菌);

γ- 溶血(不溶血):细菌不产生溶血素,菌落周围无颜色变化(如肠球菌、表皮葡萄球菌)。

3、苛养菌的培养

用于培养对营养要求苛刻的细菌,如链球菌属、奈瑟菌属、嗜血杆菌属等;

在实验室中,可通过血琼脂上的生长情况判断细菌的营养需求(如是否需要 X/V 因子)。

4、细菌菌落形态观察

不同细菌在血琼脂上形成的菌落形态(大小、形状、边缘、颜色、透明度等)具有特征性,可作为初步鉴定的依据;

例如:肺炎链球菌的菌落呈“脐状”(中央凹陷),金黄色葡萄球菌菌落呈金黄色、圆形、凸起、表面光滑。

5、临床和食品微生物检测

临床:用于呼吸道感染(如肺炎、扁桃体炎)、皮肤软组织感染等标本中致病菌的分离鉴定;

食品:用于检测食品中的致病细菌(如肉毒杆菌、李斯特菌),评估食品微生物安全性。

三、注意事项

血液需经脱纤维处理(去除纤维蛋白,避免凝固),且需无菌操作添加(通常在基础培养基灭菌后冷却至 45~50时加入);

不同动物血液对某些细菌的生长和溶血反应有影响(如马血对链球菌的溶血反应更明显),需根据检测需求选择;

制备后的血琼脂平板需 4冷藏保存,避免光照和干燥,有效期一般为 7 天。

血琼脂基础培养基因其营养全面性和鉴别功能的双重优势,成为微生物实验室不可或缺的基础培养基,在细菌分离、鉴定和临床诊断中发挥着关键作用。

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